аллоиммунные антиэритроцитарные антитела не обнаружены что это значит
СКРИНИНГ АНТИЭРИТРОЦИТАРНЫХ АНТИТЕЛ И ДРУГИЕ ПРАКТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ ИММУНОСЕРОЛОГИИ
Жибурт Е.Б., Попова В.И., Иванова И.В., Рейзман П.В.
Центр крови Минздрава России, Москва
В целях профилактики трансфузионных осложнений и аллоиммунизации рекомендуется практика определения антиэритроцитарных антител у доноров и использование тестов повышенной чувствительности для выявления очень слабых аллоантител [1, 3, 6].
Скрининг антиэритроцитарных аллоантител имеет важное клиническое значение для предупреждения развития гемолиза донорских эритроцитов, выявления аллосенсибилизированных лиц, профилактики гемолитической болезни новорожденных по антигенам системы группы крови Резус и антигенам других систем.
Методика гелевой технологии разработана Lapierre в 1990 году [1]. ID-гелевая система представляет собой пластиковые карты с микропробирками, заполненными гелем, к которому добавляются эритроциты и сыворотки. Пробирки с нейтральным гелем содержат модифицированный Sephadex с буфером и предназначены для скрининга антител. После центрифугирования в специальной центрифуге агглютинированные эритроциты задерживаются в верхних слоях геля, в то время как неагглютинированные эритроциты, беспрепятственно пройдя через гель, образуют осадок на дне пробирок. Положительные реакции наглядно отличаются от отрицательных, и могут быть разделены по силе реакции, как и при стандартных методах.
Материалы и методы
Для параллельного исследования сывороток применялись непрямая проба Кумбса в растворе низкой ионной силы (Liss-Coombs) для гелевой технологии (Diamed, Швейцария) и желатиновый метод с 10% раствором желатина (ФГУП «Мосхимфармпрепараты» имени Н.А.Семашко, Москва).
Результаты и обсуждение
Антиэритроцитарные антитела обнаружены 8 сыворотках доноров (1,4 %). Из них в желатиновом методе в 7 случаях наблюдался отрицательный результат.
Лишь в одном случае (донор Г. №8 АII Rh+) аллоантитела выявлены как желатиновым методом, так и гелевой технологией. Однако, чувствительность реакции при скрининге антител желатиновым методом (+) ниже, чем в гелевом тесте (++) (таблица 2).
Различия в распределении аллоиммунизации в зависимости от пола доноров и больных не выявлено (p>0,05).
Использование панели из трех эритроцитов в сочетании с информацией о фенотипе донора/пациента позволяет лишь предположить специфичность выявленных антиэритроцитарных антител. Для точной идентификации необходима расширенная панель эритроцитов.
Установлено, что гелевый тест является простым, быстрым и очень чувствительным методом, который сводит к минимуму ошибки, встречающиеся при использовании традиционных методик. Исследование гелевой технологией аллоантител к антигенам эритроцитов у доноров (не имеющих антител) проводят 1 раз в год [2], при отсутствии в анамнезе переливаний крови. У доноров-женщин репродуктивного возраста желательно проводить исследования антиэритроцитарных аллоантител не менее 2 раз в год.
При обнаружении нерегулярных тепловых антиэритроцитарных аллоантител все компоненты крови донора, за исключением отмытых эритроцитов, не должны быть использованы для переливания.
У больных необходимо исследовать наличие антиэритроцитарных аллоантител перед проведением каждой гемотрансфузии, и обязательно перед выпиской из стационара (через 15-30 дней после переливания эритроцитов) для определения сенсибилизации антигенами эритроцитов и дачи соответствующих рекомендаций. Если реципиенту была проведена даже одна трансфузия эритроцитсодержащих компонентов, то в последующем он попадает в группу «риска», т.к. в большинстве случаев, к сожалению, переливание проходит без типирования антигенов эритроцитов, и организм может быть сенсибилизирован отсутствующим у человека эритроцитарным антигеном. При повторном переливании донорских эритроцитов (попадании того же чужеродного антигена), возможен быстрый иммунный ответ с выработкой антиэритроцитарных аллоантител и развитием внесосудистого гемолиза.
Поиск антител после гемотрансфузии зачастую не проводится, поскольку не влияет на результат данной госпитализации и завершающегося лечения. Однако он весьма значим для последующей жизни пациента, поскольку спустя какое-то время антитела могут перестать выявляться, но сохранятся T-клетки «памяти». При необходимости переливания крови в будущем новый контакт с сенсибилизирующим антигеном будет сопровождаться бурным гуморальным иммунным ответом с возможной гемолитической трансфузионной реакцией.
В действующих документах Минздрава России нет единой точки зрения на обеспечение совместимости донора и реципиента по антигенам системы Келл (таблица 4). Серьезные проблемы создает неудачная формулировка [3] «В целях профилактики посттрансфузионных осложнений, обусловленных антигеном Келл, отделения и станции переливания крови выдают для переливания в клинику эритроцитную взвесь или массу, не содержащие этого фактора. Келл положительным реципиентам могут быть перелиты Келл положительные эритроциты». Очевидно, что первое предложение исключает второе, а значит, во-первых, ведет к уничтожению Келл-положительных эритроцитов (6-8 % всех заготовленных доз) и, во-вторых, увеличивает риск посттрансфузионного гемолиза, обусловленного антигеном k (Cellano).
При организации скрининга антиэритроцитарных антител, как и для решения многих других проблем современной трансфузионной медицины имеет важное значение оптимальное распределение ресурсов. Относительные затраты на одно исследование (амортизация оборудования, гелевые карты, панели стандартных эритроцитов) снижаются по мере увеличения количества исследований. Необходимо максимально централизовать иммуногематологические исследования, как это предусмотрено Концепцией развития службы крови в Российской Федерации в 2004-2010 годы [4].
Донор должен быть информирован о выявленных антителах. Эту информацию необходимо внести в индивидуальную медицинскую документацию и использовать при возможных переливаниях крови в будущем.
Выводы
1. Для скрининга антиэритроцитарных аллоантител оптимально использовать гелевый тест.
2. Целесообразно проводить поиск антиэритроцитарных антител спустя 2-4 недели после гемотрансфузии и сохранять данные об аллоиммунизации в медицинской документации пациента.
3. Целесообразно выносить на этикетку гемоконтейнера данные о фенотипе донора по системам групп крови Резус и Келл,
4. У Келл-положительных реципиентов оптимально использование Келл-положительных донорских эритроцитов.
5. Для индивидуального выбора донора крови в заявке на гемокомпоненты целесообразно указывать фенотип реципиента.
Литература
1. Жибурт Е.Б. Трансфузиология: учебник.- СПб: Питер, 2002.- 736 с.
2. Инструкция по предупреждению посттрансфузионных осложнений, обусловленных факторами Кеll и с(hr’) (утв. приказом Минздрава России от 9 января 1998 г. № 2)
3. Инструкция по применению компонентов крови (утв. приказом Минздрава России от 25 ноября 2002 г. № 363)
4. Решение Коллегии Минздрава РФ и Президиума Российской академии медицинских наук от 11 ноября 2003 г. «О Концепции развития службы крови в Российской Федерации» (протокол N 16)
5. Техническое руководство американской ассоциации банков крови/ Пер. с англ.- Милан: Европейская школа трансфузионной медицины, 2000.- 1035 с.
6. Требования к проведению иммуногематологических исследований доноров и реципиентов на СПК и в ЛПУ/ Методические указания Минздрава России от 11 апреля 2002 г. № 2001/109)
Аллоиммунные антитела к резус фактору RH
Описание исследования
Целью данного теста является обнаружение в организме антител к наиболее значимым эритроцитарным антигенам, особенно к резус-фактору, наличие которых говорит о повышенной чувствительности организма к этим антигенам. Резус-антитела входят в группу аллоимунных антител (антител к антигенам эритроцитов).
Появление аллоимунных антиэритроцитарных антител может быть обусловлено:
Неиммунные резус-отрицательные люди не имеют в крови антител к резус-фактору.
Из множества антигенов выделено 5 основных, самым иммуногенным из которых является D (Rh) (синоним – резус-фактор). Кроме антигенов, выделенных в систему резус, есть и другие эритроцитарные антигены, вызывающие повышенную чувствительность и, как следствие, проблемы при переливании крови.
В процессе первичного исследования крови на наличие аллоиммунных антител, выявляются не только антитела к резус-фактору, но и к другим эритроцитарным антигенам. Доминантный ген D (Rh) имеет парный рецессивный – d. Комбинация этих генов у людей с положительным резусом DD или Dd, с отрицательным – исключительно dd.
Если у беременной женщины резус-отрицательная кровь, а у ребенка – резус-положительная, возникает иммунологический конфликт по резус-фактору, который чреват выкидышем или появлением гемолитической болезни у ребенка, как в утробе, так и после рождения. Определение группы крови, резус-фактора и присутствия аллоиммунных антиэритроцитарных тел перед планируемой беременностью или во время ее необходимо для принятия своевременных мер по предотвращению этих явлений.
Резус-конфликт происходит между матерью с отрицательным резусом и ребенком с положительным. В обратном случае проблем не наблюдалось. По статистике 1 из 200-250 родов характеризуются наличием резус-конфликта между матерью и ребенком.
Иммунологический конфликт, возникающий из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам, провоцирует развитие внутриутробной гемолитической болезни ребенка и гемолитической желтухи новорожденного. Несовместимыми могут быть как D-резус и АВ0-групповые антигены, так и другие резусы (С, Е, с, d, e) и антигены (М, Kell, Duffy, Kidd). Проникновение в кровь матери с отрицательным резус-фактором любого из названных антигенов (наиболее часто D-резус-антигена) провоцирует генерацию не свойственных ей антител. Причиной явления могут быть наличие в организме матери инфекций, которые повышают проницаемость плаценты, а также небольшие травмы, кровотечения и прочие повреждение. Через нарушенную плаценту образовавшиеся антитела попадают в кровь ребенка и разрушают эритроциты.
Предрасположенность к гемолитической болезни новорожденных возникает при нарушении проницаемости плаценты, при повторных беременностях или переливании крови без учета резус-особенности крови и прочее. Проявление болезни на ранней стадии беременности может привести к выкидышу или преждевременным родам. При первой беременности вероятность возникновения иммунологического конфликта между резус-отрицательной матерью и резус-положительным плодом равна 10-15%. Антитела начинают накапливаться с 7-8 недели. Каждая последующая беременность увеличивает риск возникновения несовместимости. В развитии процесса не играет роли, родила ли женщина преждевременно или в срок, выкинула ли плод или искусственно прервала беременность. Риск возрастает, если во время первой беременности были кровотечения, если после родов проводилось ручное отделение плаценты, если кесарево сечение или роды сопровождались большой потерей крови, а также при переливании резус-отрицательной матери резус-положительной крови (независимо от того, в каком возрасте оно делалось).
Если во время второй и последующих беременностей кровь плода имеет отрицательный резус, конфликт между ним и матерью не возникает. Женщины с резус-отрицательной кровью подлежат постановке на особый учет в ЖК с мониторингом уровня резус-антител. Первый тест на антитела рекомендуется провести на сроке 8-20 недель, затем повторять его с периодичностью 1 раз в месяц (до 30 недель), 2 раза в месяц (до 36-й недели), каждую неделю (до конца срока беременности). В случае прерывания беременности на раннем сроке (до 7 недель) Rh-антитела не всегда успевают образовываться. В таком случае вторая беременность имеет такую же степень вероятности образования антител, что и первая – 10-15%.
Проверка крови на наличие аллоиммунных антиэритроцитарных антител рекомендуется также людям, готовящимся к операции, особенно тем, которым ранее уже переливали кровь.
Подготовка к исследованию
Строгие требования к подготовке не предъявляются. Желательно проводить тестирование утром натощак.
Важно! Забор биоматериала не рекомендуется проводить после мануального, ректального, инструментального, рентгеновского, ультразвукового обследования, флюорографии, физиопроцедур и других манипуляций.
Показания к исследованию
Исследования проводится с целью:
Интерпретация исследования
Результат анализа выдается в одной из формулировок «отрицательная» или «положительная».
Нормальное значение – «отрицательная».
Положительный результат говорит о повышенной чувствительности (сенсибилизации) к резус-антигену или иным эритроцитарным антигенам.
Также по результатам теста делается заключение о наличии/отсутствии в организме обследуемого аутоиммунных процессов. Эта информация выносится отдельной строкой. Отрицательный ответ свидетельствует об отсутствии аутоиммунных патологий.
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000
Исследование
Результат
Нормы интерпретации
Примечание
[163] Аллоиммунные антитела к резус фактору RH
Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела не обнаружены что это значит
Общая информация об исследовании
Резус-фактор (Rh) передается по наследству, это белок на поверхности эритроцитов. Те люди, у которых он есть (а это большинство, около 85 %), называются резус-положительными. Однако у некоторых, резус-отрицательных, этот белок отсутствует. Отрицательный резус никак не влияет на здоровье самого человека. Однако у матери и ребенка, которого она вынашивает, могут возникнуть проблемы, если у них разные резус-факторы или если у матери развиваются антитела, которые реагируют с факторами клеток крови ребенка. Наиболее распространенный пример: женщина с негативным резус-фактором (Rh-) беременна ребенком с положительным резус-фактором (Rh+). Иммунная система этой женщины может выработать антитела против резус-положительного фактора крови ее ребенка. Несмотря на это первенец довольно редко бывает больным, потому что материнский иммунитет не вступает в контакт с кровью ребенка до самых родов. Однако антитела, выработанные при первой беременности, могут свободно проникать через плаценту при следующих беременностях и таким образом создавать проблемы резус-положительному ребенку.
Для уменьшения вероятности того, что у матери Rh- выработаются антитела на кровь ребенка Rh+, ей иногда назначают инъекции анти-D-гамма-глобулина за 28-34 недели до родов, а также в первое время после рождения резус-положительного ребенка. Могут потребоваться и дополнительные инъекции во время беременности, если возникнет подозрение на то, что кровь матери контактировала с кровью плода Rh+ (например, при пункции плодного пузыря или при травмах брюшной полости). Инъекция антитела очищает кровь ребенка от присутствующих антигенов и таким образом предотвращает реакцию на них материнской иммунной системы.
Для чего используется исследование?
Анализ на антирезусные антитела применяется главным образом для обнаружения антител на резус-фактор. Резус-отрицательная мать и резус-положительный отец могут зачать Rh+ ребенка, при этом есть вероятность, что некоторые эритроциты крови ребенка попадут в кровяное русло матери во время беременности и родов. В ответ на чужеродные эритроциты Rh+ организм матери вырабатывает антирезусные антитела. Они представляют собой угрозу для будущих детей этой матери. Каждая женщина до наступления беременности либо во время нее должна сдать анализ на резус-фактор. Он поможет определить, является ли ее кровь резус-отрицательной, а также выяснить, приобрела ли резус-отрицательная женщина антитела против эритроцитов Rh+. Беременная женщина, организм которой еще не образовал антирезусные антитела, для предотвращения их появления может воспользоваться инъекциями иммуноглобулина. Резус-отрицательной женщине при беременности следует пройти дополнительное лечение иммуноглобулинами сразу после любой ситуации, когда кровь плода могла попасть в ее кровяное русло. Анализ на антирезусные антитела помогает выявлять эти процессы и вовремя назначать и корректировать лечение для предотвращения резус-конфликта.
Когда назначается исследование?
Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела (в том числе антирезусные), титр
Это выявление антител к специфическому белку, находящемуся на поверхности эритроцитов, – резус-фактору. Данные антитела являются одной из основных причин гемолитической болезни новорождённых.
Титр антирезусных антител.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.
Общая информация об исследовании
Резус-фактор (Rh) передается по наследству, это белок на поверхности эритроцитов. Те люди, у которых он есть (а это большинство, около 85 %), называются резус-положительными. Однако у некоторых, резус-отрицательных, этот белок отсутствует. Отрицательный резус никак не влияет на здоровье самого человека. Однако у матери и ребенка, которого она вынашивает, могут возникнуть проблемы, если у них разные резус-факторы или если у матери развиваются антитела, которые реагируют с факторами клеток крови ребенка. Наиболее распространенный пример: женщина с негативным резус-фактором (Rh-) беременна ребенком с положительным резус-фактором (Rh ). Иммунная система этой женщины может выработать антитела против резус-положительного фактора крови ее ребенка. Несмотря на это первенец довольно редко бывает больным, потому что материнский иммунитет не вступает в контакт с кровью ребенка до самых родов. Однако антитела, выработанные при первой беременности, могут свободно проникать через плаценту при следующих беременностях и таким образом создавать проблемы резус-положительному ребенку.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Правильно проведенное лечение анти-D-гамма-глобулинами препятствует образованию антирезусных антител практически у всех беременных женщин с отрицательным резус-фактором. Однако такая профилактика не действует, если у женщины уже образовались антирезусные антитела.
Аллоиммунные антитела к Rh-антигену
Аллоиммунные антитела — это одни из важнейших эритроцитарных антигенов, которые синтезируются организмом при сенсибилизации к белкам резус-фактора, некотором другим белковым соединениям, содержащимся на оболочке эритроцитов.
Для появления этих антител нужны специфические условия:
Резус-система состоит из 5 главных антигенов и множества дополнительных, наиболее активным считают антиген D. Существуют и другие антиэритроцитарные антигены, которые не входят в состав резус-фактора, но имеют клиническое значение. Они могут послужить причиной опасных осложнений при беременности и трансфузиях крови.
Информация об исследовании
Резус-фактор и другие иммуногенные белки эритроцитарной мембраны передаются по наследству. Большинство населения (около 85%) относится к группе резус-позитивных, то есть в мембране их клеток крови присутствуют эти специфические белки. У некоторого количества людей они не синтезируются, их относят к группе резус-негативных.
Отсутствие либо наличие резус-фактора никак не отражается на общем состоянии человека. Но могут возникать ситуации, когда резус-негативная женщина беременеет Rh-позитивным ребенком. В этом случае есть риск, что организм матери начнет производить антитела против крови ребенка. Результатом может стать гемолитическая болезнь новорожденного, выкидыш, ряд других осложнений течения беременности.
При первом вынашивании риски для ребенка невелики, но антитела сохраняются длительное время. Риск резус-конфликта при каждой следующей беременности быстро растет. Антитела длительное время циркулируют в крови, свободно проникают через плацентарный барьер. Определение антител к резус-антигенам эритроцитов – надежный, достоверный метод обнаружения вероятности резус-конфликта на ранних стадиях беременности.
Наличие высоких титров антител, может быть причиной гемолитической болезни. При этом заболевании антитела из материнской крови проникают в плод, разрушают эритроциты в крови ребенка. В результате развивается гемолитическая желтуха, поражаются почки, печень, другие органы новорожденного.
Анализ позволяет определить присутствие антител на ранних сроках беременности, следить за динамикой развития процесса, своевременно назначить соответствующее лечение.
Также этот анализ применяется перед переливанием крови для выяснения потенциальной возможности несовместимости крови донора с реципиентом по резус-системе. Особенно если пациент ранее получал переливание донорской крови.
Проводится анализ методом агглютинации, то есть склеивания. Она подразумевает, что присутствие специфических антител в крови проявится при смешивании ее с соответствующими антигенами. Произойдет склеивание эритроцитов и выпадение их в осадок. Если агглютинация произошла – анализ считается положительным, если нет – отрицательным.
Показания к исследованию
Нужна ли подготовка к исследованию
Для проведения исследования у пациента берется кровь из вены, сдается она утром, натощак. Перед анализом разрешается пить воду, нужно исключить даже кофе либо чай.
За сутки до анализа нужно исключить физические нагрузки, не употреблять спиртное и жирную пищу в больших количествах. Временной отрезок между последним приемом пищи и сдачей крови – не меньше 8 часов. Перед пробой нельзя курить, минимум 30 минут до анализа.
При несоблюдении правил по подготовке к анализу сильно снизится достоверность результатов тестирования, повышается вероятность ложноположительных реакций.
Что означают результаты исследования
Если результат анализа отрицательный – вероятность резус-конфликта невысокая, дополнительных действий не требуется. Возможно проведение повторных анализов для исключения редких случаев ложноотрицательной реакции.
Положительные результаты теста свидетельствуют о присутствии в крови специфических антител. Это свидетельствует о большой вероятности резус-конфликта. В таком случае может потребоваться назначение мер по профилактике гемолитической болезни новорожденных и тщательный подбор совместимой донорской крови.
Аллоиммунные антитела при беременности
Этот анализ является надежным методом выявления возможности резус-конфликта на ранних стадиях беременности. Rh-положительным женщинам он не требуется, назначается только беременным с Rh-отрицательным статусом.
Этих будущих рожениц ставят на особый учет, проводят регулярный динамический контроль за уровнем аллоиммунных антител:
Если Rh-отрицательная женщина вынашивает резус-положительный плод, но аллоиммунные антитела не выявлены, показано профилактическое введение специфических гамма-глобулинов. Они позволяют предотвратить выработку антител и способствуют безопасному протеканию первой и последующих беременностей.
Если антитела уже присутствуют в организме женщины – введение гамма-глобулинов не назначается, так как они могут только препятствовать образованию новых антител, но не снижают титр уже существующих.
Важно знать!