Морула эмбрион что это
Оценка качества эмбрионов
Центральным звеном клиники ЭКО является эмбриологическая лаборатория. Для каждой попытки ЭКО заводится «Эмбриологический протокол», в котором отражается судьба каждого эмбриона от момента получения ооцитов и до момента переноса или замораживания.
Сразу после получения ооцитов и сперматозоидов производится их морфологическая оценка. По результатам анализа эякулята (спермограмме) принимают решение о способе оплодотворения – ЭКО или ИКСИ.
Описание: День 0. Непосредственно после пункции оценивают зрелость полученных ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). ОКК с прозрачным кумулюсом как правило содержит зрелый ооцит и получает оценку «1-1».При пункции возможно получение зрелых, незрелых, а также дегенеративных и разрушенных яйцеклеток. Точная оценка состояния ооцита возможна только после его очистки перед проведением ИКСИ.
В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII.
Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).
Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) при нормальном оплодотворении образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы. В этом случае им присваивают оценку 2pN. Если пронуклеусов не видно, что обычно связано с отсутствием оплодотворения, в протокол записывается 0pN. При неправильном оплодотворении возможно появление нескольких пронуклеусов, что отражается в записи, например 3pN, 6pN и т.д.(Рис2). «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.
Рис 2. Первый день развития in vitro – формирование зиготы и образование пронуклеусов. А – 2pN (нормальное оплодотворение) – два пронуклеуса Б – 3pN (аномальное оплодотворение) – больше, чем два пронуклеуса.
Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение пяти-шести дней. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа (2 сутки), 72-74 часа (3 сутки) и 120 часов (5 сутки) после оплодотворения. Дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление). Для наглядности эмбриологи используют численно – буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква их качество. Для обозначения эмбриона хорошего качества используется буквенный индекс «А», среднего «B», низкого «С». Возможны и промежуточные варианты, например АВ, ВА, ВС, СВ, когда сложно дать однозначную оценку (Рис3).
2-й день (4А) 3-й день (8А) 4-й день (comp)
Рис 3. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro и компактная морула на 4-й день развития. Представлены эмбрионы отличного (А) качества. B – бластомер ZP – блестящая оболочка.
Рис 4. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro. Представлены эмбрионы хорошего (ВА, В) и удовлетворительного (ВС) качества. Во втором ряду эмбрионы с неравномерным дроблением (3Bun и 4BAun).
К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию (границы его клеток становятся неразличимы) и готовится к образованию бластоцисты. Его клетки могут быть частично (p.comp) или полностью компактизованы (comp) (Рис.5). Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится ввиду малой информативности данной стадии развития. Однако наличие компактизации на вторые сутки может свидетельствовать об аномальном развитии и обязательно должна отражаться в эмбриологическом протоколе.
На пятые сутки, примерно через 120 часов после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту (Bl) (Рис.6). Оценка качества бластоцист подразумевает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») и окружающих ее клеток – трофобласта (от «а» до «с»). Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 5, имеющие многоклеточную ВКМ и трофобласт – Bl4Aa, Bl4Ab. Бластоцисты среднего качества обозначаются как – Bl2Bb, Bl3Bb, а плохого – BlCc.
Рис 6. Бластоцисты на пятый день развития in vitro. e.bl – ранняя бластоциста, Bl3Ab – экспандированная бластоциста, Bl5Ab – бластоциста перед хетчингом, ВКМ – внутренняя клеточная масса.
Дальнейшее развитие эмбриона происходит уже в матке после имплантации. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки. Данный процесс называется вылупление, или хетчинг. В случае, когда эмбриолог отмечает изменения блестящей оболочки и после криоконсервации эмбрионов процесс самостоятельного вылупления бластоцисты может быть затруднен и его возможно облегчить применяя вспомогательный хетчинг. В нашем центре мы используем наиболее эффективный лазерный вспомогательный хетчинг.
Самая высокая частота оплодотворения получена при переносе эмбрионов на стадии бластоцисты. Так, в нашем центре она составляет 53%. В то время, как при переносе на стадии 6-8 бластомеров – 47%.
Замораживание и ПГД также лучше всего выполнять на стадии бластоцисты. Однако, не все эмбрионы доходят до бластоцисты. Поэтому общепринятым считается следующий подход: если на 5 день культивирования имеется меньше 5 эмбрионов, как минимум один переносят, остальные оставляют до 5 дня. Из достигших бластоцисты еще один может быть перенесен (двойной перенос), остальные замораживают. Если на 3 день эмбрионов 5 и больше, их не переносят и оставляют культивировать до 5 дня. На 5 день одну, реже две бластоцисты переносят, остальные замораживают.
В заключение следует отметить, что описываемые морфологические критерии оценки качества эмбрионов являются основными, необходимыми, но не всегда достаточными для выбора эмбриона для переноса. Так, нередко после переноса эмбрионов высшего качества имплантация не наступает и, наоборот, бывают случаи наступления и успешного развития беременности при переносе эмбрионов плохого качества. Поэтому существуют дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-laps, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.
Бластоциста в процессе хетчинга (выхода из блестящей оболочки для имплантации)
Скидка 50% на первичный прием репродуктолога
Заполнив анкету для будущих родителей, вы сэкономите время врача на первичном приеме, поэтому он будет для вас стоить 50% от обычной цены.
О классификации эмбрионов. Буквы и цифры в обозначении
Основная задача эмбриолога – выбрать наиболее перспективный по качеству эмбрион! А как оценивают то самое качество?
Как оценивают качество эмбриона
В большинстве программ (кроме программ эко с генетическим исследованием эмбрионов) основная оценка происходит по морфологическим признакам эмбриона – внешнему строению.
Морфологических признаков много, в основном, ориентируются на количество клеток (должно соответствовать дню развития), степень фрагментации, равномерность дробления.
⠀
День пункции – 0 день! На следующий день эмбриолог смотрит, как прошло оплодотворение – это 1 сутки развития! ⠀
В норме можно наблюдать такую картину:
Именно цифрой обозначается количество клеток (бластомеров) у эмбриона.
Далее после цифры идёт буква – обозначает наличие (степень фрагментацию) или ее полное отсутствие.
Эмбрионы с фрагментацией D не переносят и не замораживают. Буквенно-цифровое обозначение выглядит как 8А, 6В и так далее, А считается лучшим показателем.
⠀
Если говорить о бластоцистах – эмбрионах 5 суток, то их качество оценивается по размеру, качеству внутриклеточной массы (сам эмбрион) и качеству трофэктодермы (клеток, дающим начало хориону, плаценте).
⠀
Здесь цифрами обозначается размер бластоцисты:
Первая буква в аббревиатуре – качество внутриклеточной массы:
Вторая буква в аббревиатуре – качество трофобласта, который даёт начало внезародышевым оболочкам эмбриона:
Соответственно, буквы АА означают лучшее качество.
Наш замечательный эмбриолог
Морфологическая оценка – это лишь то, что эмбриолог видит глазом! Успех программы зависит от генетического статуса эмбриона, о котором мы можем узнать только по результатам генетического скрининга. Так бывает, что отличный морфологически эмбрион несёт в себе генетические патологии. А иногда эмбрион среднего качества по анализу приходит абсолютно здоровым, который при переносе даёт нормальную беременность!
Ваши вопросы о классификации эмбрионов
Эмбрион среднего качества. Однако, шансы на успех все же есть, если этот эмбрион генетически здоров.
Риск хромосомных аномалий зависит в большей степени от возраста, однако среди эмбрионов категории С доля аномальных – выше.
Морфологически – это эмбрион среднего качества. Учитывая ваш возраст, конечно, большее значение имеет генетический статус.
Стадия компактизации – это стадия, предшествующая моруле. Если качество соответствует суткам развития, то шансы конечно есть.
Это хорошее качество.
Качество ниже среднего, риск, что есть хромосомные аномалии – выше, особенно учитывая, что это эмбрионы 7 суток
Статья проверена и одобрена Главным врачём Центра ЭКО «Виталис» Течиевой Жанной Сергеевной
Данная статья не может быть использована для постановки диагноза, назначения лечения и не заменяет прием врача!
Этапы ЭКО: оценка качества эмбрионов
Результаты экстракорпорального оплодотворения зависят от огромного количества факторов, но именно эмбриологический этап процедуры имеет важнейшее, практически определяющее результат, значение.
В предыдущих публикациях мы говорили о том, на какие этапы делится ЭКО и рассказали о двух из них – стимуляции контролируемой суперовуляции и трансвагинальной пункции фолликулов яичников. На этот раз речь пойдет о важнейшем этапе развития и селекции эмбрионов.
На следующие сутки после проведения трансвагинальной пункции фолликулов яичников и оплодотворения яйцеклеток (ооцитов) эмбриолог извлекает чашки и внимательно осматривает яйцеклетки – ищет так называемые пронуклеусы.
Для Homo Sapiens – это 23 хромосомы, включая одну половую. И сперматозоид, и яйцеклетка несут именно по половинчатому набору хромосом. При оплодотворении же происходит их объединение и получается исходный объём генетической информации – 46 хромосом, включая 2 половые.
Яйцеклетка всегда несёт X половую хромосому. Сперматозоид же может нести как Х хромосому, так и Y половую хромосому. При объединении двух X хромосом будущий ребёнок получает женский пол, а при объединении X и Y половых хромосом – мужской.
Соответственно, в ооците на первые сутки после оплодотворения, должно появиться 2 пронуклеоса (1 материнский и 1 отцовский). Но бывает это далеко не всегда, причем независимо от метода оплодотворения. Эмбриолог может находить оба пронуклеоса, только один, больше двух, или ни одного.
Два пронуклеоса – оплодотворение произошло, 0 или 1 пронуклеос – с большей вероятностью нет. Если обнаруживается более 2 пронуклеосов – оплодотворение произошло, но неправильно (возможно яйцеклетка первоначально имела не один набор хромосом, а два, возможно, что два «набора» было в сперматозоиде; кроме того, не исключено, что 2 сперматозоида оплодотворили одну яйцеклетку).
Разберём эти случаи. Два пронуклеоса эмбриолог может не увидеть в первые сутки. Рационально пересмотреть не оплодотворившиеся ооциты на 2-е или 3-и сутки. Нередко бывает, что яйцеклетки, не оплодотворившиеся по данным первого осмотра, демонстрируют признаки оплодотворения или уже дробления (увеличение количества клеток у развивающегося эмбриона) при повторном осмотре на 2-е или 3-и сутки после проведения трансвагинальной пункции фолликулов яичников. Эмбрионы же, имеющие 1 или более 2 пронуклеусов могут в дальнейшем развиваться, а могут и нет. Идеальный вариант – наличие в ооците двух пронуклеусов на первые сутки после проведения пункции.
Дальше идет дробление. Эмбриолог за время дробления смотрит эмбрионы дважды: на третьи и на пятые сутки после проведения пункции. В ряде случаев эмбрионы пересматриваются ещё и на вторые и/или шестые сутки.
Как же должны выглядеть эмбрионы на всех этих этапах своего развития? Сначала придётся ввести понятие о классах эмбрионов в зависимости от степени фрагментации, иначе дальше будет сложно.
В порядке увеличения уровня фрагментации: класс А – класс В – класс С – класс D. Эмбрионы с «хорошим» уровнем фрагментации – А и В. На 2-е сутки развития эмбрион, в идеале, состоит из 4 клеток, но количество клеток может варьировать от 2 до 6. 3-и сутки – от 6 до 12 клеток (бластомеров), чаще всего 8. 4-е сутки – от 10 клеток и более.
Эмбрионы, имеющие количество клеток более 10, начинают процесс так называемой «компактизации» – уплотнения бластомеров эмбриона и уменьшение пространства между клетками. Такие эмбрионы называются морулами, и они делятся на классы с 1 по 4 (G1/G2/G3/G4). Самыми «симпатичными» являются G1, а наименее перспективными – G4. И на 5-е сутки развития эмбрион может оставаться морулой. Несмотря на факт отставания в развитии, перенос таких эмбрионов может приводить к наступлению беременности, заканчивающейся рождением здорового ребёнка. Это относится к морулам G1 и G2.
На 5-е сутки эмбрионы состоят уже из более чем 32 клеток (бластомеров) и называются бластоцистами. Они так же делятся на классы от Б1 до Б6. И здесь, в отличие от морул, чем выше класс, тем перспективнее эмбрион. Следом за «цифрой класса» идёт двухбуквенное обозначение. Две заглавных буквы от А до С показывают, в сущности, тоже, что и аналогичные буквенные обозначения у дробящихся эмбрионов 2-3 суток развития. Только одна буква обозначает внутренний слой клеток, а вторая – внешнюю клеточную массу.
Как же выглядят перспективные эмбрионы 5 суток? Есть такое понятие как «эмбрионы хорошего качества» и для 5-х суток развития к ним относятся бластоцисты, начиная с класса Б3ВВ. Значит ли, что остальные эмбрионы бесперспективны? Нет, и морула G1 и бластоциста Б3СС могут приводить к наступлению беременности, и на них не всегда стоит ставить крест. Просто такие случаи относительно редки и эти эмбрионы менее перспективны, нежели тот же Б3ВВ или Б4АВ.
А вот перенос морулы G3 или бластоцисты, имеющей одну или две буквы D в обозначении (Б2СD, Б5DD), вряд ли приведёт к наступлению долгожданной беременности, и от переноса таких эмбрионов рационально воздержаться.
Автор статьи Бендусов Иван Алексеевич, заведующий отделением ЭКО
Как проходит оценка качества эмбрионов? FAQ
Центральным звеном клиники ЭКО является эмбриологическая лаборатория. Для каждой попытки ЭКО заводится «Эмбриологический протокол», в котором отражается судьба каждого эмбриона от момента получения ооцитов и до момента переноса или замораживания.
Сразу после получения ооцитов и сперматозоидов производится их морфологическая оценка. По результатам анализа эякулята (спермограмме) принимают решение о способе оплодотворения – ЭКО или ИКСИ.
Описание: День 0. Непосредственно после пункции оценивают зрелость полученных ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). ОКК с прозрачным кумулюсом как правило содержит зрелый ооцит и получает оценку «1-1».При пункции возможно получение зрелых, незрелых, а также дегенеративных и разрушенных яйцеклеток. Точная оценка состояния ооцита возможна только после его очистки перед проведением ИКСИ.
В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII.
Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).
Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) при нормальном оплодотворении образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы. В этом случае им присваивают оценку 2pN. Если пронуклеусов не видно, что обычно связано с отсутствием оплодотворения, в протокол записывается 0pN. При неправильном оплодотворении возможно появление нескольких пронуклеусов, что отражается в записи, например 3pN, 6pN и т.д.(Рис2). «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.
Рис 2. Первый день развития in vitro – формирование зиготы и образование пронуклеусов. А – 2pN (нормальное оплодотворение) – два пронуклеуса Б – 3pN (аномальное оплодотворение) – больше, чем два пронуклеуса.
Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение пяти-шести дней. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа (2 сутки), 72-74 часа (3 сутки) и 120 часов (5 сутки) после оплодотворения. Дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление). Для наглядности эмбриологи используют численно – буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква их качество. Для обозначения эмбриона хорошего качества используется буквенный индекс «А», среднего «B», низкого «С». Возможны и промежуточные варианты, например АВ, ВА, ВС, СВ, когда сложно дать однозначную оценку (Рис3).
2-й день (4А) 3-й день (8А) 4-й день (comp)
Рис 3. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro и компактная морула на 4-й день развития. Представлены эмбрионы отличного (А) качества. B – бластомер ZP – блестящая оболочка.
Рис 4. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro. Представлены эмбрионы хорошего (ВА, В) и удовлетворительного (ВС) качества. Во втором ряду эмбрионы с неравномерным дроблением (3Bun и 4BAun).
К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию (границы его клеток становятся неразличимы) и готовится к образованию бластоцисты. Его клетки могут быть частично (p.comp) или полностью компактизованы (comp) (Рис.5). Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится ввиду малой информативности данной стадии развития. Однако наличие компактизации на вторые сутки может свидетельствовать об аномальном развитии и обязательно должна отражаться в эмбриологическом протоколе.
На пятые сутки, примерно через 120 часов после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту (Bl) (Рис.6). Оценка качества бластоцист подразумевает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») и окружающих ее клеток – трофобласта (от «а» до «с»). Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 5, имеющие многоклеточную ВКМ и трофобласт – Bl4Aa, Bl4Ab. Бластоцисты среднего качества обозначаются как – Bl2Bb, Bl3Bb, а плохого – BlCc.
Рис 6. Бластоцисты на пятый день развития in vitro. e.bl – ранняя бластоциста, Bl3Ab – экспандированная бластоциста, Bl5Ab – бластоциста перед хетчингом, ВКМ – внутренняя клеточная масса.
Дальнейшее развитие эмбриона происходит уже в матке после имплантации. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки. Данный процесс называется вылупление, или хетчинг. В случае, когда эмбриолог отмечает изменения блестящей оболочки и после криоконсервации эмбрионов процесс самостоятельного вылупления бластоцисты может быть затруднен и его возможно облегчить применяя вспомогательный хетчинг. В нашем центре мы используем наиболее эффективный лазерный вспомогательный хетчинг.
Самая высокая частота оплодотворения получена при переносе эмбрионов на стадии бластоцисты. Так, в нашем центре она составляет 53%. В то время, как при переносе на стадии 6-8 бластомеров – 47%.
Замораживание и ПГД также лучше всего выполнять на стадии бластоцисты. Однако, не все эмбрионы доходят до бластоцисты. Поэтому общепринятым считается следующий подход: если на 5 день культивирования имеется меньше 5 эмбрионов, как минимум один переносят, остальные оставляют до 5 дня. Из достигших бластоцисты еще один может быть перенесен (двойной перенос), остальные замораживают. Если на 3 день эмбрионов 5 и больше, их не переносят и оставляют культивировать до 5 дня. На 5 день одну, реже две бластоцисты переносят, остальные замораживают.
В заключение следует отметить, что описываемые морфологические критерии оценки качества эмбрионов являются основными, необходимыми, но не всегда достаточными для выбора эмбриона для переноса. Так, нередко после переноса эмбрионов высшего качества имплантация не наступает и, наоборот, бывают случаи наступления и успешного развития беременности при переносе эмбрионов плохого качества. Поэтому существуют дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-laps, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.
Бластоциста в процессе хетчинга (выхода из блестящей оболочки для имплантации)
Развитие эмбрионов
1 день. Оценка оплодотворения.
Спустя 16-18 часов после инсеминации (слияния полученных ооцитов и спермы) производится первая оценка оплодотворения. К этому времени эмбриолог видит сформировавшиеся пронуклеусы. На данном этапе происходит первая селекция – неоплодотворенные ооциты и аномальные зиготы изолируются от нормальных зигот.
Рис.1 Оплодотворенные яйцеклетки (пронуклеусы) – видны по два клеточных ядра.
2 день. Контроль развития эмбрионов.
Через 48 часов после получения ооцитов эмбриолог оценивает дробление эмбрионов, их морфологию (строение). Под морфологической оценкой понимают количество бластомеров (клеток) и аномалии цитоплазмы и ядра.
Идеальный эмбрион на 2 день должен иметь 4 равных по размеру одноядерных бластомеры без фрагментации.
Рис.2 Слева на картинке идеально сформированный эмбрион, состоящий из 4 бластомеров. Справа – строение нарушено, дальнейшее развитие прекратилось.
3 день. Контроль развития эмбрионов.
Через 72 часа после получения ооцитов производится оценка эмбрионов по следующим параметрам:
Количество бластомеров (клеток)- указывается цифра. В норме – 6-8 клеток.
На 3 день эмбриолог и лечащий врач могут принимать решение о сроке переноса эмбрионов. При переносе эмбрионов на 5 – день, на 3-й день все качественные эмбрионы переносятся в другую среду для культивирования до стадии бластоцисты.
Рис.3 Слева эмбрион отличного качества – оценка 8; Эмбрион по центру имеет небольшую фрагментацию – оценка 6 Sl Fr; Справа эмбрион сильно фрагментирован, подсчет бластомеров затруднен.
4 день. Дальнейшее культивирование эмбрионов.
К 4 дню процесс компактизации должен быть завершен, и эмбрион достигает стадии морулы.
Рис 4. Две отлично сформированные морулы.
5 день. Культивирование эмбрионов и перенос.
К этому времени эмбрион должен развиться до стадии бластоцисты. На основании морфологических признаков делается оценка возможности бластоцисты к дальнейшему развитию и принимается решение о ее пригодности к переносу в полость матки или витрификации (заморозке). Бластоцисты имеют цифровую и буквенную оценки.
Оценка степени развития бластоцисты и статуса хэтчинга (вылупления из оболочки):
1 – ранняя бластоциста: бластоцель меньше половины объема эмбриона (eBl);
2- бластоциста: бластоцель больше половины объема эмбриона (Bl 2);
3- полная бластоциста: бластоцель полностью заполняет эмбрион (Bl 3)$
4- экпандированная бластоциста: бластоцель полностью заполняет эмбрион, истончение зоны внешней оболочки (Bl 4 и Bl 5)
5- вылупляющаяся бластоциста: трофэктодерма начинает выступать их зоны вншней оболочки (Bl 5);
Оценка внутренне клеточной массы:
А – много плотно упакованных клеток;
B – несколько свободно сгруппированных клеток;
C – мало клеток, клетки плохо сгруппированы.
Оценка трофэктодермы:
А – много клеток, формирующих связанный эпителий;
В — несколько клеток, формирующих свободный эпителий;
C — несколько клеток серповидной формы.
Таким образом, эмбрион получает тройную оценку: BL 5АА