Ответов в этой теме: 17 Страница: 1 2 «« назад || далее »»
[ Ответ на тему ]
Автор
Тема: Выбор термометра
Инженер по качеству Пользователь Ранг: 234
15.12.2009 // 22:47:48 Редактировано 2 раз(а)
> Автоклав никакой гильзой не укомплектован,
Вы что, собираетесь вносить изменение в конструкции поднадзорного сооружения?
Может все же удовлетворитесь давлением?
15.12.2009 // 22:51:50 Кстати, максимальный термометр поможет ровно столько, сколько и минимальный. Нам не нужно знать пиковую температуру, а отработка заданной. И колебания от задания.
varban VIP Member Ранг: 8699
16.12.2009 // 8:41:15
Мерить, скажем, раз в минуту, в течении 15 минут, когда автоклав вышел на режим. Перевести в температуру.
Расчитать минимальную, максимальную и среднюю температуру и сравнить с паспортными характеристиками.
Если в методике (предписании) записано определение температуры в автоклаве максимальным термометром, имейте ввиду, что это ерунда. И несмотря на то, что методика (предписании) высочайше утверждена (спущена), то она НЕПРАВИЛЬНА.
Вроде все.
Инженер по качеству Пользователь Ранг: 234
16.12.2009 // 13:06:08
Мерить, скажем, раз в минуту, в течении 15 минут, когда автоклав вышел на режим. Перевести в температуру.
Расчитать минимальную, максимальную и среднюю температуру и сравнить с паспортными характеристиками.
Если в методике (предписании) записано определение температуры в автоклаве максимальным термометром, имейте ввиду, что это ерунда. И несмотря на то, что методика (предписании) высочайше утверждена (спущена), то она НЕПРАВИЛЬНА.
16.12.2009 // 13:48:53 Редактировано 1 раз(а)
У нас в лаборатории используются Максимальный термометр СП-82 (от 20 до 150 градусов), но это не выход, как было отмечено выше, их интересуют не максимальная температура, а именно поддержание установленной температуры определённый промежуток времени. В дополнение к физическим измерениям используем химические вещества, типа глюкозы и биотесты. Вот этим и выходим из положения.
varban VIP Member Ранг: 8699
Если проверяющие настаивают на свою методику, отправляйте их вслед.
Иначе в следующий раз будут предписывать, какой стороной разбивать варенные яйца на завтрак.
Ответов в этой теме: 17 Страница: 1 2 «« назад || далее »»
Аттестация и поверка стерилизаторов выполняется с определенной периодичностью.
При этом поверяются отдельные элементы, и стерилизаторы проходят тестирование на соответствие определенных параметров ГОСТам и нормативным документам.
Аттестация и поверка (то есть метрологический контроль состояния, МКС) необходима для следующих типов стерилизаторов:
Термометры, манометры, мановакуумметры. В зависимости от типа (Автоклавы классов B, S, N).
Термометры, температура внутри рабочей камеры
Измерительные приборы плазменных автоклавов
Для паровых и воздушных стерилизаторов в процедуру поверки и метрологического контроля состояния (МКС) может входить контроль показателей:
Свяжитесь с нами: ответим на любые вопросы по стерилизаторам. Поможем проверить текущее состояние. Проведем совместную дистанционную диагностику. Или приедем для полноценной проверки на месте.
Нормативная база для испытаний и метрологического контроля (поверки) стерилизаторов
Применяются и другие документы и нормативные акты. При этом методика и периодичность испытаний стерилизаторов может отличаться, в зависимости от сферы (области) применения и типов стерилизаторов: Воздушные / паровые / низкотемпературные / газовые в медицине, фармакологии, промышленности, лабораторных исследованиях, и т.д.
Поверка средств измерений (манометров, термометров и тд.) осуществляется специализированными организациями.
Периодичность поверки и калибровки манометров стерилизатора
Контроль состояния и поверка манометров и мановакуумметров должен выполняться не реже 1 раза в 5 лет.
Для некоторых производителей необходима ежегодная поверка, такие вопросы можно уточнить в технической документации к стерилизатору, у производителя или сервисной компании. При этом важно, что дата первой поверки манометра рассчитывается в зависимости от дня изготовления (сроки хранения стерилизатора на складе и его ввод в эксплуатацию при этом не учитываются).
Гидравлические испытания стерилизатора
Несмотря на всю важность и обязательность поверок отдельных элементов и аттестации стерилизаторов, важнейшим гарантом безопасности использования стерилизационного оборудования остается его регулярное и правильное техническое обслуживание опытными инженерами в соответствии со всеми регламентами и рекомендациями производителей.
КОНТРОЛЬ РАБОТЫ ПАРОВЫХ И ВОЗДУШНЫХ СТЕРИЛИЗАТОРОВ
Методы и средства контроля работы паровых и воздушных стерилизаторов представлены в таблице П. 5.1.
Проверку температурного режима осуществляют с помощью максимальных термометров, которые помещают в контрольные точки стерилизаторов в соответствии с таблицей П. 5.2 (паровые стерилизаторы) и таблицей П. 5.3 (воздушные стерилизаторы). Предельные отклонения температуры в различных точках стерилизационной камеры от номинальных значений температур стерилизации должны соответствовать показателям, приведенным в таблице 4.1 (паровые стерилизаторы) и таблице 4.2 (воздушные стерилизаторы) данных методических указаний.
Для контроля температуры используют также химические индикаторы (индикаторы типа ИС, химические тесты), которые помещают в контрольные точки, указанные выше.
Индикаторы типа ИС представляют собой полоску бумаги с нанесенным на нее индикаторным слоем.
Химические тесты представляют собой стеклянные трубки, содержащие химические соединения или их смеси с красителями.
Медицинский персонал, использующий средства физического и химического контроля, регистрирует результаты контроля в журнале по форме № 257/у (табл. П. 5.4).
Бактериологический контроль работы стерилизационной аппаратуры осуществляют с помощью биотестов, оценивая гибель спор термоустойчивых микроорганизмов. Биотесты представляют собой дозированное количество спор тест-культуры (табл. П. 5.1) на носителе (или в нем), помещенном в упаковку, которая предназначена для сохранения целостности носителя со спорами и предупреждения вторичного обсеменения после стерилизации. В качестве носителей используют инсулиновые флаконы, чашечки из алюминиевой фольги (для паровых и воздушных стерилизаторов), а также диски из фильтровальной бумаги (для воздушных стерилизаторов). Упакованные биотесты помещают в те же контрольные точки стерилизационной камеры, что и средства физического и химического контроля.
Основанием для заключения об эффективной работе стерилизационной аппаратуры является отсутствие роста тест-культуры при бактериологических исследованиях всех биотестов в сочетании с удовлетворительными результатами физического и химического контроля.
Таблица П.5.1.
Контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов
Таблица П. 5.4.
Код формы по ОКУД
Код учреждения по ОКПО
МЗ РФ
Медицинская документация. Форма № 257/у Утверждена МЗ СССР 04.10.80 г. №1030
Наименование учреждения
Журнал
Работы стерилизаторов воздушного, парового (автоклава)
КОНТРОЛЬ СТЕРИЛЬНОСТИ ИЗДЕЛИЙ МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ
Требования к помещению для посева на стерильность.
1.1. Контроль стерильности изделий, простерилизованных в ЛПУ, проводят в специально оборудованных помещениях, соблюдая асептические условия, исключающие возможность вторичной контаминации изделий микроорганизмами.
Посев исследуемого материала желательно проводить в настольных боксах с ламинарным потоком воздуха.
1.2. В боксированном помещении стены должны быть окрашены масляной краской или выложены кафельной плиткой, не должны иметь выступов, карнизов, щелей, трещин; пол в боксе и рабочий стол должны быть покрыты линолеумом или другим гладким, легко моющимся и устойчивым к действию дезинфицирующих средств материалом; стенки и ножки стола должны быть окрашены масляной краской.
1.3. Боксы оборудуют приточно-вытяжной вентиляцией (с преобладанием притока над вытяжкой) с подачей в них воздуха через бактериальные фильтры.
1.4. В боксе и предбокснике устанавливают бактерицидные облучатели в соответствии с нормами, предусмотренными действующими инструктивно-методическими документами (Руководство Р.3.1.683—98 «Использование ультрафиолетового бактерицидного излучения для обеззараживания воздуха и поверхностей в помещениях»).
Подготовка бокса, инструментов и персонала к работе.
2.1. Перед проведением работы поверхности в помещениях бокса и предбоксника (стены, пол, оборудование и др.), а также внутренние поверхности настольного бокса протирают 3% раствором перекиси водорода с 0,5% раствором моющего средства. В случае обнаружения в воздухе грибов или спорообразующих микроорганизмов обработку проводят 6% раствором перекиси водорода с 0,5% раствором моющего средства или 6% раствором средства «Пероксимед», или 2% раствором средства «ПВК» (концентрации приведены по ДВ).
Через 45—60 мин после обработки в бокс вносят все необходимые для работы материалы и инструменты, кроме образцов изделий.
2.2. При проведении работы в настольном боксе в нем включают вентиляцию на время, достаточное для обеспечения полного обмена воздуха, а затем помещают необходимый для работы материал.
2.3. В боксе и предбокснике перед работой включают бактерицидные облучатели. Длительность облучения определяют в соответствии с документом, упомянутым в п. 1.4.
2.4. Вспомогательные инструменты и лабораторную посуду, используемые в работе, а также спецодежду предварительно стерилизуют. В процессе работы вспомогательные инструменты 2—3 раза заменяют аналогичным стерильным комплектом.
Внутреннюю поверхность настольного бокса обрабатывают так же, как и помещение бокса. Через 45—60 мин после обработки в бокс вносят все необходимые для работы материалы и инструменты, кроме образцов изделий.
2.5. Перед входом в бокс работники лаборатории тщательно моют руки теплой водой с мылом, вытирают их стерильным полотенцем (салфеткой), надевают в предбокснике бахилы, стерильные халаты, 4-слойные Маски, шапочки и стерильные перчатки.
2.6. В процессе работы в боксе проверяют обсемененность воздуха. Для этого на рабочий стол ставят 2 чашки с питательным агаром, открывая их на 15 мин, затем чашки помещают в термостат при температуре 32°С на 48 часов.
Допускается рост не более трех колоний не спорообразующих сапрофитов на чашке.
В случае роста более трех колоний дополнительно проводят обработку бокса 6% раствором перекиси водорода с 0,5% раствором моющего средства или 6% раствором средства «Пероксимед» или 2% раствором средства «ПВК».
Правила отбора проб.
3.1. В стационарах, имеющих централизованные стерилизационные, контролю на стерильность подлежит не менее 1% от числа одновременно простерилизованных изделий одного наименования.
3.2. В стационарах, не имеющих централизованных стерилизационных и осуществляющих стерилизацию в отделениях, контролю на стерильность подлежат не менее двух одновременно простерилизованных изделий одного наименования.
3.3. Отбор проб на стерильность проводит лаборант центра Госсанэпиднадзора, дезинфекционной станции или медицинская сестра под руководством сотрудника бактериологической лаборатории.
3.4. При стерилизации изделий в упакованном виде (централизованная и децентрализованная стерилизация) все изделия, подлежащие контролю, направляют в бактериологическую лабораторию в упаковке, в которой осуществляли их стерилизацию. Перед доставкой в лабораторию стерильные изделия в упаковке дополнительно заворачивают в стерильную простыню или помещают в наволочку
После проведения контроля стерильности все изделия, за исключением перевязочных материалов, подлежат обязательному возврату для последующего использования
4. Методика и техника посева на стерильность.
4.1. Посевы на стерильность проводит бактериолог с помощью лаборанта.
4.2. Перед посевом исследуемый материал вносят в предбоксник, предварительно сняв наружную мягкую упаковку. В предбокснике с помощью стерильного пинцета (корнцанга) стерилизационные коробки, пакеты протирают снаружи стерильной салфеткой (ватным тампоном), смоченной 6% раствором перекиси водорода, перекладывают на стерильный лоток и оставляют на 30 мин, затем переносят в бокс. При поступлении изделий, упакованных в два слоя бумаги, пергамента, ткани, первый слой снимают в предбокснике и изделия во внутренней упаковке переносят в бокс.
4.3. В боксе с помощью стерильного пинцета изделия извлекают из стерилизационной коробки, пакета или другой упаковки.
4.4. Контроль стерильности проводят путем прямого посева (погружения) изделий целиком (при их небольших размерах) или в виде отдельных деталей (разъемные изделия) и фрагментов (отрезанные стерильными ножницами кусочки шовного, перевязочного материала и т. п.) в питательные среды. Объем питательной среды в пробирке (колбе, флаконе) должен быть достаточным для полного погружения изделия (деталей или фрагментов изделия).
При проверке стерильности более крупных изделий проводят отбор проб методом смывов с различных участков поверхности изделий: с помощью стерильного пинцета (корнцанга) каждый участок тщательно протирают марлевой салфеткой (размер салфетки 5х5 см), увлажненной стерильной питьевой водой или стерильным 0,9% раствором хлорида натрия, или раствором нейтрализатора (при стерилизации раствором химического средства). Каждую салфетку помещают в отдельную пробирку с питательной средой.
У изделий, имеющих функциональные каналы, рабочий конец опускают в пробирку с питательной средой и с помощью стерильного шприца или пипетки 1—2 раза промывают канал этой средой.
4.5. При контроле стерильности проводят посев на тиогликолевую среду (сухая питательная среда для контроля стерильности НИИВС им. И. И. Мечникова) и среду Сабуро. Состав сред и способ их приготовления приведены в приложении № 1 к приказу Минздрава СССР от 31 июля 1978 г. № 720 «Об улучшении медицинской помощи больным с гнойными хирургическими заболеваниями и усилении мероприятий по борьбе с внутрибольничной инфекцией» (тиогликолевую среду из сухой питательной среды готовят способом, указанным на этикетке).
При контроле изделий каждого наименования обязателен одновременный посев на обе указанные питательные среды.
На пробирках, колбах и флаконах с посевами делают надписисуказанием даты посева, номеров загрузки и образца.
4.6. Посевы в тиотликолевую среду выдерживают в термостате при температуре 32°С, посевы в среду Сабуро — при температуре 20—22’С в течение 14 суток при контроле изделий, простерилизованных растворами химических средств и газовым методом, в течение 7 суток — изделий, простерилизованных термическими (паровой, воздушный) методами.
4.7. При отсутствии роста микроорганизмов во всех пробирках (колбах, флаконах) делают заключение о стерильности изделий.
Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.
1.1. Методические указания предназначены для персонала дезинфекционных и санитарно-эпидемиологических станций, а также персонала лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ), осуществляющих контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов.
1.2. Контроль осуществляют физическим, химическим и бактериологическим методами. Для контроля используют средства измерения температуры, давления, времени, химические тесты, термохимические индикаторы и биотесты.
1.3. Физический и химический методы контроля являются методами оперативного контроля параметров режимов работы паровых и воздушных стерилизаторов (температура стерилизации, давление, время стерилизационной выдержки), результаты которого учитывают в процессе стерилизационного цикла или сразу после его окончания (максимальная температура, достигнутая в ходе стерилизационного цикла). Бактериологический метод контроля позволяет контролировать эффективность работы стерилизатора.
1.4. Контроль работы стерилизаторов в ЛПУ включает контроль после монтажа и ремонта аппарата и контроль в процессе его эксплуатации. Последний подразделяют на плановый контроль, самоконтроль и контроль по показаниям, который проводят при получении неудовлетворительных результатов контроля стерильности изделий медицинского назначения, неудовлетворительных результатов физического, химического и бактериологического контроля.
1.5. В функции персонала дезинфекционных станций и дезинфекционных отделов (отделений) санитарно-эпидемиологических станций входит контроль работы стерилизатора после монтажа и ремонта, плановый контроль, а также контроль по показаниям при обнаружении неудовлетворительных результатов контроля стерильности изделий медицинского назначения.
1.6. В функции персонала ЛПУ входит самоконтроль работы аппаратов и контроль по показаниям при получении неудовлетворительных результатов физического и химического контроля, неудовлетворительных результатов контроля стерильности изделий медицинского назначения.
1.7. Контроль работы стерилизатора после монтажа и ремонта аппарата, плановый контроль и контроль по показаниям, проводимый персоналом дезинфекционных станций, дезинфекционных отделов (отделений) санитарно-эпидемиологических станций, осуществляют физическим, химическим и бактериологическим методами. Самоконтроль работы аппаратов и контроль по показаниям, проводимый персоналом ЛПУ, осуществляют физическим и химическим методами.
1.8. Плановый контроль работы всех стерилизаторов в объектах надзора проводят в порядке государственного санитарного надзора не реже 2 раз в год.
Самоконтроль работы стерилизатора проводят при каждой загрузке аппарата.
1.9. При проведении контроля контрольные тесты (максимальные термометры, химические тесты, термохимические индикаторы и биотесты упаковывают вместе в пакеты из упаковочной бумаги (ОСТ 42-21-2-85), нумеруют и размещают по схеме в контрольные точки паровых (приложение 1) и воздушных (приложение 2) стерилизаторов.
1.10. При проведении контроля персоналом дезинфекционных станций и дезинфекционных отделов (отделений) санитарно-эпидемиологических станций протокол контроля работы стерилизатора составляют в двух экземплярах. Один экземпляр направляют главному врачу ЛПУ после получения результатов бактериологического контроля.
1.10.1. Изделия медицинского назначения без индивидуальной упаковки, стерилизовавшиеся в стерилизационных коробках, в которые закладывали средства контроля, подлежат повторной стерилизации после их извлечения.
1.10.2. При контроле объекта надзора проверяют оснащенность ЛПУ стерилизационным оборудованием и средствами контроля, санитарное состояние помещения стерилизационной, знание и практические навыки персонала в обслуживании аппаратов, наличие необходимой документации.
1.11. При осуществлении самоконтроля работы аппаратов персонал, обслуживающий стерилизатор, закладывает максимальные термометры (раздел 2), химические тесты и термохимические индикаторы (раздел 3) в стерилизационную камеру, следит на протяжении цикла стерилизации за показаниями контрольно-измерительных приборов, оценивает результаты контроля и дает заключение о возможности выдачи простерилизованных изделий.
1.11.1. Медицинский персонал, использующий стерилизованные изделия, закладывает химические тесты и термохимические индикаторы (раздел 3) в стерилизационные коробки или внутрь стерилизуемых упаковок, оценивает результаты контроля и принимает решение о возможности использования простерилизованных изделий.
1.11.2. Персонал, обслуживающий стерилизационное оборудование, регистрирует этапы процесса стерилизации и результаты физического и химического контроля в журнале, пронумерованном, прошнурованном и скрепленном печатью медицинского учреждения. Форма журнала в соответствии с формой 257/у, утв. МЗ СССР № 1039 от 04.10.89 г.
1.11.3. Ответственность за организацию стерилизационных мероприятий в ЛПУ, включая организацию самоконтроля работы стерилизационной аппаратуры, возлагается на главного врача данного учреждения.
1.12. Загрузка паровых и воздушных стерилизаторов при всех видах контроля регламентирована «Методическими рекомендациями по организации централизованных стерилизационных в лечебно-профилактических учреждениях», утв. МЗ СССР № 15-6/8 от 01.02.90 г.
2. Физический метод контроля
2.1. Физический метод контроля предназначен для оперативного контроля параметров режимов работы паровых и воздушных стерилизаторов (температура стерилизации, давление, время стерилизационной выдержки). Результаты контроля позволяют оперативно выявить неисправность аппарата и контрольно-измерительных приборов и ориентировочно оценить правильность загрузки стерилизатора в каждом конкретном случае.
2.2. Физический метод контроля работы стерилизаторов осуществляют с помощью средств измерения температуры (термометр, термометр максимальный), давления (мановакуумметр) и времени (секундомер, часы).
2.3. Параметры режима работы стерилизатора следует проверять в течение цикла стерилизации, проводимого в соответствии с паспортом на аппарат.
2.4. Контроль параметров режимов работы паровых стерилизаторов:
2.4.1. Контроль температурного параметра режимов работы паровых стерилизаторов осуществляют с использованием термометра ртутного стеклянного максимального с диапазоном измерения от 0 до 150 °С (ТП-7). Погрешность измерения не должна превышать ±1 °С.
Упакованные термометры (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки 1 и 2 камеры паровых стерилизаторов в соответствии с приложением 1.
По окончании цикла стерилизации регистрируют показания термометров и сопоставляют их между собой, а также с номинальной температурой стерилизации.
Отклонения в показаниях максимальных термометров допускаются в пределах, регламентированных ОСТ 42-21-2-85.
2.4.2. Давление в стерилизационной камере парового стерилизатора измеряют при помощи мановакуумметра. Класс точности мановакуумметра должен быть не ниже 2,5. Предел измерения от 0,1 до 0,5 МПа (от 1 до 5 кгс/см 2 ).
Установку давления на манометре парового стерилизатора, соответствующего заданной температуре стерилизации, проводят согласно приложению 3.
2.4.3. Ежедневно перед началом рабочей смены проводят контроль герметичности камеры стерилизатора, снабженного вакуумным насосом, по следующей методике:
Для контроля герметичности в рабочей камере создают максимально возможное разрежение. При выключенном вакуумнасосе давление в камере не должно изменяться в течение времени, которое предусмотрено инструкцией по эксплуатации для сушки материалов после стерилизации. Повышение давления в камере более 0,005 МПа (0,05 кгс/см 2 ) указывает на подсос воздуха.
2.4.4. Хронометраж цикла стерилизации проводят с помощью механического секундомера по ГОСТ 5072-79, класс точности 2,0 или часов наручных механических с погрешностью суточного хода ±1 минута.
2.5. Контроль параметров режимов работы воздушных стерилизаторов.
2.5.1. Контроль температурного параметра режимов работы воздушных стерилизаторов в течение цикла стерилизации проводят путем наблюдения за показаниями приборов, установленных на стерилизаторе (термометр, индикаторные устройства на панели аппарата).
2.5.2. Распределение температур внутри загруженной стерилизационной камеры проводят с использованием термометра ртутного стеклянного максимального с диапазоном измерения от 0 до 200 °С (ТП-25). Погрешность измерения температуры не должна превышать ±1 °С.
Упакованные максимальные термометры (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки камеры воздушных стерилизаторов в соответствии с приложением 2.
По окончании цикла стерилизации регистрируют показания термометров и сопоставляют их с номинальной температурой стерилизации.
Отклонения в показаниях максимальных термометров допускаются в пределах, регламентированных ОСТ 42-21-2-85.
2.5.3. Хронометраж цикла стерилизации проводят аналогично п. 2.4.4.
2.6. Периодически и по показаниям персонал проводит самоконтроль работы паровых и воздушных стерилизаторов по методике с прерванным циклом стерилизации, которая позволяет оценить температурные параметры режимов работы стерилизаторов в процессе стерилизационного цикла с использованием максимальных термометров и химических тестов.
2.6.1. Самоконтроль работы паровых стерилизаторов проводят по следующей методике: упакованные максимальные термометры (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки паровых стерилизаторов в соответствии с приложением 1. Работу парового стерилизатора прекращают через 7 минут стерилизационной выдержки.
Оценку показаний максимальных термометров проводят аналогично п. 2.4.1.
Методика самоконтроля паровых стерилизаторов с использованием химических тестов изложена в п. 3.3.5.1.
2.6.2. Самоконтроль работы воздушных стерилизаторов проводят по следующей методике: упакованные максимальные термометры (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки воздушных стерилизаторов в соответствии с приложением 2.
Работу воздушного стерилизатора прекращают через 30 минут стерилизационной выдержки.
Оценку показаний максимальных термометров проводят аналогично п. 2.5.2.
Методика самоконтроля работы воздушных стерилизаторов с использованием химических тестов изложена в п. 3.3.5.2.
2.8. При обнаружении неудовлетворительных результатов контроля в процессе стерилизационного цикла и после его окончания загрузку считают непростерилизованной. Аппарат прекращают использовать, анализируют правильность осуществления требуемого режима стерилизации, правильность загрузки и исправность аппарата. При обнаружении неисправности специально выделенное лицо, ответственное за проведение стерилизации медицинского инструментария, вызывает представителя ПО «Медтехника» для ее устранения.
Стерилизатор разрешают использовать после устранения причин неудовлетворительной работы стерилизатора и получения удовлетворительных результатов контроля.
3. Химический метод контроля
3.1. Химический метод контроля предназначен для оперативного контроля одного или в совокупности нескольких параметров режимов работы паровых и воздушных стерилизаторов.
3.2. Химический метод контроля работы стерилизаторов осуществляют с помощью химических тестов и термохимических индикаторов.
3.3. Химический тест представляет запаянную с обоих концов стеклянную трубку, заполненную смесью химического соединения с органическим красителем или только химическим соединением (веществом), изменяющим свое агрегатное состояние и цвет при достижении определенной для него температуры плавления.
3.3.1. В таблицах 1 и 2 представлен перечень соединений, рекомендуемых для изготовления химических тестов, и рецептуры химических тестов. Подбор химических соединений проведен с учетом минимально допустимых температур используемых режимов стерилизации, регламентированных ОСТ 42-21-2-85.
3.3.2. Упакованные химические тесты (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки паровых (приложение 1) и воздушных (приложение 2) стерилизаторов.
3.3.3. По окончании стерилизации химические тесты вынимают из стерилизатора и визуально определяют изменение их агрегатного состояния и цвета.
3.3.3.1. При удовлетворительном результате контроля химические тесты должны равномерно расплавиться и изменить цвет, что свидетельствует о достижении заданной температуры стерилизации.
3.3.3.2. При неудовлетворительном результате контроля равномерное расплавление и изменение цвета химических тестов отсутствует, т.е. заданная температура стерилизации не была достигнута.
3.3.4. При обнаружении неудовлетворительных результатов химического контроля поступают, как указано в п. 2.8.
3.3.5. Самоконтроль работы паровых и воздушных стерилизаторов с использованием химических тестов.
Рецептуры химических тестов для контроля температурных параметров режимов работы паровых стерилизаторов
Наименование составных частей
Цвет, форма кристаллов, запах
Количество компонента, г
Температурный параметр, подлежащий контролю, °С
Бесцветные кристаллы или белый порошок без запаха
Краситель 4 Фуксин кислый или Феноловый красный или Бромтимоловый синий или Генциано-фиолетовый
Белый или со слабым желтоватым оттенком кристаллический порошок со слабым характерным запахом
Сера элементарная 5
Бесцветные игольчатые кристаллы или белый порошок
Бесцветные игольчатые кристаллы или белый порошок
Бесцветные кристаллы в виде ромбических призм
Белый кристаллический порошок со слабым запахом
Химические тесты для контроля температурных параметров режимов работы воздушных стерилизаторов
Наименование химического соединения
Цвет, форма кристаллов, запах
Количество элемента, г
Температурный параметр, подлежащий контролю, °С
Белый или белый со слабым желто-зеленым оттенком кристаллический порошок без запаха
Порошок белого цвета или прозрачные бесцветные кристаллы
Бесцветные или светло-серые серебристые кристаллы
Блестящие бесцветные кристаллы
3.3.5.1. Самоконтроль работы паровых стерилизаторов (п. 2.6.1) проводят по следующей методике: упакованные химические тесты (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки паровых стерилизаторов в соответствии с приложением 1. Работу парового стерилизатора прекращают через 7 минут стерилизационной выдержки.
Оценку показаний химических тестов проводят аналогично п. 3.3.3.
3.3.5.2. Самоконтроль работы воздушных стерилизаторов (п. 2.6.2) проводят по следующей методике: упакованные химические тесты (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки воздушных стерилизаторов в соответствии с приложением 2. Работу воздушного стерилизатора прекращают через 30 минут стерилизационной выдержки.
Оценку показаний химических тестов проводят аналогично п. 3.3.3.
При обнаружении неудовлетворительных результатов химического контроля поступают, как указано в п. 2.8.
3.4. Термохимические индикаторы предназначены для оперативного контроля одного (температура) или совокупности нескольких параметров режимов работы паровых (температура, наличие остаточного воздуха, присутствие водяного насыщенного пара под избыточным давлением) и воздушных стерилизаторов (температура и время стерилизации).
3.4.1. Термохимический индикатор представляет собой полоску бумаги, на которую нанесена термоиндикаторная краска. Определение параметров, достигнутых в процессе стерилизации, основано на изменении цвета термоиндикаторной краски при достижении «температуры перехода», строго определенной для каждой краски.
3.4.2. Для контроля соблюдения параметров режимов работы паровых стерилизаторов могут быть использованы импортные средства контроля «Indicator Tape», «Sterikig А С», выпускаемые фирмой «Wipak Medical» (Финляндия), «Strate-line sterilization Monitor», выпускаемые фирмой «Propper Mfg. Co’ Inc., L.I.C., N.Y. 1101», «Autoclave Indicator Tape», выпускаемые фирмой «3М Со» (США) и др., в соответствии с инструкцией по применению.
3.4.3. В таблице 3 приведен перечень термоиндикаторных красок, рекомендуемых для изготовления термохимических индикаторов, применяемых для контроля параметров режима работы воздушных стерилизаторов.
3.4.4. Методика подготовки термоиндикаторных красок к употреблению и меры предосторожности при работе с ними изложены в инструкции завода-изготовителя.
Марка термоиндикаторной краски
Минимально допустимая температура стерилизации, °С
Характеристика термоиндикаторной краски
Свидетель достижения минимально допустимой температуры 170 °С
Примечание : Краски изготавливает Рижский лакокрасочный завод. Адрес завода: 226007, г. Рига, ул. Даугавпилс, 63/65.
3.4.6. Пронумерованные термохимические индикаторы размещают в контрольные точки воздушных стерилизаторов в соответствии с приложением 4 (приклеивают или прикрепляют на пакеты с контрольными тестами или на упаковку стерилизуемых изделий).
3.4.7. По окончании стерилизации термохимические индикаторы вынимают из стерилизатора и визуально определяют изменение их цвета.
3.4.7.1. При удовлетворительном результате контроля термохимические индикаторы должны изменить цвет до заданного, что свидетельствует о соблюдении параметров режима стерилизации.
3.4.7.2. При неудовлетворительном результате контроля изменение цвета термохимических индикаторов до заданного отсутствует, т.е., параметры режима стерилизации не соблюдены.
3.4.8. При обнаружении неудовлетворительных результатов термохимических индикаторов поступают, как указано в п. 2.8.
4. Бактериологический метод контроля
4.1. Бактериологический метод контроля предназначен для контроля эффективности работы стерилизаторов на основании выявления гибели спор тест-культур.
4.2. Бактериологический метод контроля работы стерилизаторов осуществляют с помощью биотестов.
4.3. Биотест представляет собой дозированное количество тест-культуры на носителе (или в нем), помещенном в упаковку. Упаковка предназначена для сохранения целостности носителя со спорами и предупреждения вторичного обсеменения после стерилизации.
4.3.1. Биотесты для контроля работы паровых стерилизаторов представляют собой флаконы из трубки стеклянной для лекарственных средств, ФИ/1-5 НС 1 ТУ 640709-10-88 (инсулиновые флаконы) или чашечки из алюминиевой фольги, содержащие высушенные споры тест-культуры Bacillus stearothermophilus BКM В-718.
4.3.2. Биотесты для контроля работы воздушных стерилизаторов представляют собой упакованные носители, перечисленные в п. 4.3.1, кроме того могут быть применены в качестве носителя диски из фильтровальной бумаги (ГОСТ 12026-76), содержащие высушенные споры тест-культуры Bacillus licheniformis штамм G.
4.4. Биотесты готовят бактериологические лаборатории дезинфекционных станций или санитарно-эпидемиологических станций в соответствии с методикой, изложенной в приложении 5.
4.5. Бактериологическая лаборатория выдает биотесты в пакетах из упаковочной бумаги (ОСТ 42-21-2-85), запечатанных в полиэтиленовые пакеты, которые служат для доставки биотестов.
4.6. Упакованные биотесты (п. 1.9) нумеруют и размещают в контрольные точки паровых (приложение 1) и воздушных (приложение 2) стерилизаторов.
4.7. По окончании стерилизации биотесты вынимают из стерилизатора, помещают в полиэтиленовый пакет и в тот же день доставляют в бактериологическую лабораторию с сопроводительным бланком.
4.8. Культивирование тест-культур после бактериологического контроля работы стерилизаторов осуществляют в соответствии с приложением 5.
4.9. При получении от бактериологической лаборатории извещения по телефону при заключении о неудовлетворительных результатах бактериологического контроля поступают, как указано в п. 2.8.
Стерилизатор разрешают использовать после устранения причин неудовлетворительной работы стерилизатора и получения удовлетворительных результатов бактериологического контроля.
5. Показатели качества работы стерилизаторов
5.1. Показателем качества работы стерилизаторов при соблюдении заданных условий их эксплуатации является соответствие отклонения температуры в различных точках камеры стерилизатора регламентированным, о чем свидетельствуют:
— показания максимальных термометров;
— изменение исходного состояния химических тестов (агрегатное состояние и цвет);
— изменение цвета термохимических индикаторов;
— отсутствие роста тест-культур в биотесте при культивировании после стерилизации.
6. Причины неудовлетворительных результатов контроля работы паровых и воздушных стерилизаторов
6.1. К причинам неудовлетворительных результатов контроля работы паровых и воздушных стерилизаторов следует отнести:
7. Контроль линейных размеров химического теста и его герметичности.
8. Упаковка химического теста.
Взвешивание компонентов осуществляют на весах лабораторных общего назначения 4-го класса точности по ГОСТ 24104-88 с наибольшими пределами взвешивания 200 г. Допускаемая погрешность взвешивания 0,01 г. В случае наличия комкования используемые вещества предварительно размельчают и просеивают через сито с проволочной сеткой.
Процесс приготовления состава химического теста состоит в перемешивании
Полученные заготовки стеклянных трубок запаивают с одного конца в пламени газовой или жидкостной горелки.*
Заполненные стеклянные трубки запаивают со второго конца в пламени газовой или жидкостной горелки.
После запайки проводят метрический контроль размеров стеклянной трубки с помощью штангенциркуля с ценой деления 0,1 мм или с помощью измерительной металлической линейки с ценой деления 1 мм. Для достижения стандартности тестов стенки трубок должны быть одинаковой толщины, длина трубок 45 ± 5 мм, наружный диаметр 4 ± 1 мм.
После проведения контроля на герметичность химические тесты в количестве 3050 штук заворачивают в оберточную или упаковочную бумагу. К каждой такой упаковке прикладывают упаковочный лист с указанием обозначения химического теста, срока годности и количества единиц в упаковке. Срок годности химического теста определяют по сроку годности химического соединения, который указан на этикетке.
Исходные химические вещества следует хранить в местах, недоступных для общего пользования, в герметичной таре, в темном сухом прохладном помещении.
Лекарственные средства списка Б должны храниться в отдельных запирающихся шкафах.
Химические тесты хранят в упаковке в сухих помещениях.
* Для укупорки тестов нельзя использовать ватно-марлевые и резиновые пробки, так как они не обеспечивают герметичности теста, что приводит к растворению состава химических тестов в конденсате (контроль работы паровых стерилизаторов) и контакту стерилизуемых изделий с веществами, образующимися при нагревании состава химических тестов (контроль работы воздушных стерилизаторов).
Указанные соединения характеризуются общетоксическим и раздражающим действием на организм.
Работа с этими химическими соединениями требует изолированного помещения с эффективной общеобменной приточно-вытяжной вентиляцией, в том числе наличия местных вытяжных устройств (вытяжного шкафа).
Персонал, изготавливающий химические тесты, проходит предварительный и периодический (раз в год) медицинские осмотры. Лица с повышенной чувствительностью к применяемым химическим соединениям, а также имеющие противопоказания по состоянию здоровья в соответствии с приказом МЗ СССР от 29 сентября 1989 г. № 555 «О совершенствовании системы медицинских осмотров трудящихся и водителей индивидуальных транспортных средств к работе не допускаются.
При изготовлении и запайке химических тестов необходимо не допускать рассыпания и пыления веществ. Следует избегать попадания их на кожу и слизистые оболочки. Все работы необходимо проводить в спецодежде (хлопчатобумажных халатах и резиновых перчатках). По окончании работы руки следует вымыть мылом и смазать кремом.
При отсутствии вытяжного шкафа работы следует проводить с использованием средств индивидуальной защиты органов дыхания (фильтрующий универсальный респиратор марки РУ-60 М или РПГ-67 с противогазовым патроном марки 4 «А»), защитных очков марок ПО-2, ПО-3, а также резиновых перчаток.
Первая помощь при случайном отравлении
При несоблюдении мер предосторожности у персонала могут возникнуть признаки отравления.
В этом случае пострадавшего следует вывести из рабочего помещения на свежий воздух, снять загрязненную спецодежду, обеспечить покой и согревание. При необходимости его следует направить в медпункт, для оказания врачебной помощи.
При раздражении дыхательных путей рекомендуется ингаляция водяным паром, 2 % раствором питьевой соды.
После этого выпить небольшими глотками теплое молоко с содой или боржоми.
При болезненном кашле следует использовать средства против кашля (таблетки от кашля, мукалтин).
При случайном проглатывании химических соединений необходимо выпить несколько стаканов воды или раствор марганцевокислого калия розового цвета (1:5000, 1:10000) и затем вызвать рвоту механическим раздражением корня языка. После рвоты рекомендуется обильное питье теплой воды или чая, применение взвеси активированного угля (2 столовые ложки на литр воды).
При сохранении признаков отравления следует обратиться за специальной медицинской помощью.
Приложение 5
1. Приготовление биотестов осуществляют в боксе, специально оборудованной комнате или шкафу с ламинарным потоком воздуха с соблюдением асептики.
2. Для проведения работы ежедневно помещения боксов и предбоксника подвергают тщательной обработке. Стены, пол, поверхности инвентаря протирают 3 % раствором перекиси водорода с 0,5 % моющего средства (Триас-А, Астра, Лотос). В случае обнаружения в воздухе грибов или споровых форм микроорганизмов влажную уборку проводят 6 % раствором перекиси водорода с 0,5 % выше перечисленных моющих средств.
Перед внесением материалов в настольном боксе включают вентиляцию на время, достаточное для обеспечения полного обмена воздуха в нем.
В процессе посева в боксе регулярно проверяют обсемененность воздуха. Для этого на рабочий стол ставят 2 чашки с питательным агаром, открывая их на 15 минут, затем чашки помещают в термостат при температуре 37 °С на 48 часов. Допускается рост не более трех колоний неспорообразующих сапрофитов.
В случае роста на чашках более 3 колоний проведение дальнейших работ в данном боксе запрещается, в нем дополнительно проводят тщательную обработку 6 % раствором перекиси водорода с 0,5 % моющих средств.
Приготовление растворов комплекса перекиси водорода с моющими средствами Триас-А, Астра, Лотос проводят в соответствии с расчетом, приведенным в таблице.
Состав рабочего раствора
Количество пергидроля, воды, моющего средства, необходимое для приготовления 1 л раствора
Пергидроля в зависимости от концентрации в нем перекиси водорода
Моющего средства, г
концентрация перекиси водорода в пергидроле
количество пергидроля в мл на 1 л раствора
При приготовлении раствора пергидроль приливают к раствору моющего средства.
3. Методика приготовления биотестов включает следующие этапы: подготовку тест-культуры, подготовку носителей (изготовление, мойка, стерилизация), обсеменение и высушивание носителей, упаковка биотестов, определение фактической плотности обсеменения носителей, контроль устойчивости тест-культуры на носителе, хранение приготовленных биотестов.
4. Тест-культуры Bacillus stearothermophilus BКM В-718 (контроль работы паровых стерилизаторов) и Bacillus licheniformis штамм G (контроль воздушных стерилизаторов) хранятся в музее культур ВНИИ профилактической токсикологии и дезинфекции МЗ СССР.
Адрес института: 117246, г. Москва, Научный проезд, д. 18.
5. Согласно «Положению о порядке учета, хранения, обращения, отпуска и пересылки культур бактерий, вирусов, риккетсий, грибов, простейших, микоплазм, бактериальных токсинов, ядов биологического происхождения» МЗ СССР, 1980 г., отпуск тест-культур производится по официальному требованию за подписью руководителя учреждения, скрепленному печатью учреждения, запрашивающего тест-культуру.
6. Биотесты приготавливают партиями. Партией считают определенное количество биотестов, приготовленных из исходной культуры в условиях производства, считающихся одинаковыми (получение спор на одной партии питательной среды, одновременное высушивание носителей и т.д.).
7. Методика приготовления питательных сред для получения спор тест-культур изложена в приложении 6.
8. Биотесты, используемые для контроля работы паровых и воздушных стерилизаторов, должны иметь стандартизированные показатели устойчивости тест-культур: время выживания тест-культур на носителе.
8.1. Устойчивость тест-культур должна быть воспроизводимой характеристикой от даты приготовления до истечения срока годности биотеста.
8.2. Каждую приготовленную партию биотестов проверяют соответственно на устойчивость тест-культур на носителе к водяному насыщенному пару под избыточным давлением (приложение 6, п. 19) или сухому горячему воздуху (приложение 7, п. 19).
8.2.1. Из каждой партии биотестов методом случайной выборки отбирают две группы биотестов в количестве не менее 10 образцов каждая.
8.2.3. При получении неудовлетворительных результатов испытаний биотестов (п. 8.2) проводят повторный контроль удвоенного количества биотестов от той же партии. Результаты повторных испытаний распространяют на всю партию.
8.3. Показатели устойчивости тест-культур в соответствии с приложением 6, п. 19 (7, п. 19) обеспечивают надежный контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов на режимы стерилизации изделий медицинского назначения.
9. Биотесты маркируют. Маркировка включает следующие данные: наименование тест-культуры; метод стерилизации, который подлежит контролю; номер партии; число спор на носителе; показатели устойчивости тест-культур; срок годности; условия хранения; наименование организации-изготовителя.
К наборам биотестов следует прилагать методику культивирования тест-культур после стерилизации и методику обеззараживания инфицированного материала.
10. Биотесты хранят при комнатной температуре. Срок хранения 2 года от даты изготовления. По истечении этого срока проводят повторно контроль устойчивости.
11. Для культивирования тест-культур после определения устойчивости к соответствующему стерилизующему агенту (приложения 6, 7 п. 19) и после бактериологического контроля работы стерилизаторов (раздел 4) в бактериологической лаборатории с соблюдением правил асептических условий биотесты вынимают из упаковки. Во флаконы вносят 1 мл питательной среды и закрывают стерильными резиновыми пробками (№ 7, 5) с целью предупреждения высыхания питательной среды (в случае отсутствия резиновых пробок во флаконы вносят 5 мл питательной среды и закрывают стерильными ватно-марлевыми пробками), диски из фильтровальной бумаги и чашечки из фольги пинцетом, который обжигают в пламени, помещают в бактериологические пробирки с 5 мл питательной среды.
12. Методика приготовления питательных сред для культивирования тест-культур после стерилизации изложена в приложении 6.
13. Учет результатов бактериологического контроля проводят путем ежедневного визуального осмотра всех биотестов с питательной средой:
13.1. при использовании бульона Хоттингера, питательного бульона сухого, мясопептонного бульона, бульона из перевара кровяных сгустков, сухой питательной среды для контроля стерильности рост тест-культур определяют по помутнению питательной среды;
Биотесты считают стерильными, если помутнение (изменение цвета) питательной среды отсутствует, что указывает на гибель спор тест-культуры, т.е. на эффективность работы стерилизатора.
Предварительное заключение о неудовлетворительном результате контроля делают по помутнению (изменению цвета) питательной среды.
14. Окончательный ответ выдают после высева из пробирок (флаконов) с признаками роста и сравнения выделенной культуры с контролем. Рост других культур микроорганизмов относят за счет вторичного обсеменения.
15. В качестве контроля используют биотест, который не подвергают действию стерилизующего агента, и питательную среду, которую применяют для культивирования тест-культур после стерилизации. Контрольные тесты культивируют аналогично биотестам, которые подвергали действию стерилизующего агента.
16. При отсутствии роста тест-культур в контрольном биотесте, который не подвергали действию стерилизующего агента, устанавливают причины (нежизнеспособность тест-культуры, нарушение методики приготовления биотестов, питательных сред, культивирования). Результаты бактериологического исследования аннулируют и повторяют контроль работы аппарата.
17. После регистрации результатов бактериологического исследования лабораторную посуду (чашки Петри, пробирки, пипетки), пробки, посевы обеззараживают в паровых стерилизаторах под давлением при температуре (126 ± 2) °С (0,15 МПа (1,5 кгс/см 2 ), время выдержки 120 минут.
18. При обнаружении неудовлетворительных результатов бактериологического контроля работы стерилизатора бактериологическая лаборатория извещает об этом по телефону руководителя медицинского учреждения и направляет заключение о результате бактериологического контроля.
Приложение 6
1. Штамм бактерий B. stearothermophilus BКM В-718 получен из Всесоюзной коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР.
Посевы инкубируют при температуре 55 ± 1 °С в течение 24 часов. При росте культуры происходит помутнение питательной среды.
Посевы инкубируют при температуре 55 ± 1 °С в течение 24 часов.
10. Чистоту культур на всех этапах культивирования контролируют высевом на чашки Петри с агаром (агар Хоттингера, питательный агар сухой, мясопептонный агар).
Чашки Петри инкубируют при температуре 55 ± 1 °С в течение 48 часов, после чего производят подсчет выросших колоний.
12. Титр жизнеспособных спор в исходной суспензии определяют как среднее арифметическое числа колоний с учетом разведения исходной суспензии и объема пробы для посева.
Вычисляем общее число колоний, найденных во всех трех чашках Петри соответствующих разведений:
Среднее число колоний на чашках составит для разведения
Из расчета посевной дозы (0,1 мл на каждую чашку) вычисляем титр жизнеспособных спор в 1 мл исходной суспензии с учетом разведений, далее находим средние арифметические числа колоний:
14. Подготовленные носители стерилизуют паровым методом при температуре 120 + 2 °С, время стерилизационной выдержки 45 минут или воздушным методом при температуре °C, время стерилизационной выдержки 60 минут в упаковке из бумаги (чашечки из фольги раскладывают в чашки Петри).
16. Носители высушивают в термостате при температуре 37 ± 1 °С или эксикаторе под осушителем (силикагель, хлористый кальций) при комнатной температуре в течение 24 часов.
17. Каждый биотест закладывают в пакет из упаковочной бумаги (флаконы) или заворачивают в бумагу упаковочную по типу порошка (чашечки из алюминиевой фольги), раскладывают в полиэтиленовые пакеты, маркируют и запаивают.
18. Для определения фактической плотности обсеменения используют не менее трех биотестов от каждой партии. Во флаконы вносят 1,0 мл стерильной дистиллированной воды (чашечки из алюминиевой фольги отмывают в широкогорлых пробирках с бусами в 10 мл) и встряхивают в течение 10 минут на аппарате для встряхивания жидкостей с последующим высевом на поверхность трех чашек Петри с агаром (агар Хоттингера, питательный агар сухой) по 0,1 мл суспензии из трех последовательных десятикратных разведений исходной суспензии. Среднее число спор в биотесте должно быть в соответствии с приложением 6, п. 15.
19. Определение устойчивости спор тест-культуры B. stearothermophilus BКM В-718 к действию водяного насыщенного пара под избыточным давлением проводят при температуре 120 + 2 °С.
Аналогичное исследование проводят в течение 15 минут времени выдержки (время гибели спор тест-культуры на носителе).
Контроль температуры осуществляют максимальными термометрами.
Показатели устойчивости тест-культуры B. stearothermophilus ВКМ В-718 на носителе к действию водяного насыщенного пара под избыточным давлением
Устойчивость спор тест-культуры B. stearothermophilus ВКМ В-718 на носителе к действию водяного насыщенного пара под избыточным давлением при температуре (120 + 2) °С в паровом стерилизаторе
не менее 5 минут для каждого образца
по приложению 6, п. 19
не более 15минут для каждого образца
по приложению 6, п. 19
20. Партию биотестов считают годной для использования, если показатели устойчивости спор тест-культуры B. stearothermophilus ВКМ В-718 соответствуют требованиям, указанным в таблице.
21. Для культивирования тест-культуры B. stearothermophilus ВКМ В-718 используют питательный бульон (бульон Хоттингера, питательный бульон сухой, мясопептонный бульон, бульон из перевара кровяных сгустков, полусинтетическую среду с индикатором феноловым красным), содержащий 0,5 % глюкозы.
Биотесты инкубируют при температуре 55 ± 1 °С в течение 7 суток.
Приложение 7
1. Штамм бактерий B. licheniformis G выделен в 1984 году при контроле стерильности чашек Петри, подвергнутых стерилизации сухим горячим воздухом.
Посевы инкубируют при температуре 37 ± 1 °С в течение 24 часов. При росте культуры происходит помутнение питательной среды.
Посевы инкубируют при температуре 37 ± 1 °С в течение 24 часов.
8. Суспензию спор хранят в холодильнике при температуре 4 °С в стерильных пробирках, закрытых ватно-марлевыми пробками с резиновыми колпачками. Срок хранения 2 года.
10. Чистоту культуры на всех этапах культивирования контролируют высевом на чашки Петри с агаром (агар Хоттингера, мясопептонный агар).
Чашки Петри инкубируют при температуре 37 ± 1 °С в течение 48 часов, после чего производят подсчет выросших колоний.
12. Титр жизнеспособных спор в исходной суспензии определяют аналогично приложению 6, п. 12.
14. Подготовленные носители стерилизуют паровым методом при температуре 120 + 2 °С, время стерилизационной выдержки 45 минут или воздушным методом при температуре °С, время стерилизационной выдержки 60 минут в упаковке из бумаги (чашечки из фольги и диски из фильтровальной бумаги раскладывают в чашки Петри).
16. Носители высушивают в термостате при температуре 37 ± 1 °С или эксикаторе под осушителем (силикагель, хлористый кальций) при комнатной температуре в течение 24 часов.
17. Каждый биотест закладывают в пакет из упаковочной бумаги (флаконы без ватно-марлевых пробок во избежание возгорания) или заворачивают в бумагу упаковочную по типу порошка (чашечки из алюминиевой фольги, диски из фильтровальной бумаги), раскладывают в полиэтиленовые пакеты, маркируют и запаивают.
18. Для определения фактической плотности обсеменения используют не менее трех биотестов от каждой партии. Во флаконы вносят 1,0 мл стерильной дистиллированной воды (чашечки из алюминиевой фольги и диски из фильтровальной бумаги отмывают в бактериологических пробирках с бусами в 1 мл) и встряхивают в течение 10 минут на аппарате для встряхивания жидкостей с последующим высевом на поверхность трех чашек Петри с агаром (агар Хоттингера, питательный агар сухой, мясопептонный агар) по 0,1 мл суспензии из исходной суспензии и двух последовательных десятикратных разведений исходной суспензии. Среднее число спор в биотесте должно быть в соответствии с приложением 7, п. 15.
19. Определение устойчивости спор тест-культуры B. licheniformis штамм G к действию сухого горячего воздуха проводят при температуре 160 ± 2 °С в воздушных стерилизаторах с принудительной циркуляцией и скоростью движения воздуха более 1 м/с, которые обеспечивают допустимые перепады от номинального значения температуры (ГП-20, ГП-40, ГП-80).
Биотесты в упаковочной бумаге помещают на полку воздушного стерилизатора, предварительно прогретого до 160 °С при исследовании биотестов с использованием чашечек из алюминиевой фольги и дисков из фильтровальной бумаги и до 140 °С при использовании флаконов в качестве носителей. Стерилизатор закрывают и после достижения температуры 160 ± 2 °С начинают отсчет времени воздействия. Через 4 минуты времени выдержки (время выдерживания спор тест-культуры на носителе) аппарат отключают.
Аналогичное исследование проводят в течение 30 минут времени выдержки (время гибели спор тест-культуры на носителе).
Контроль температуры осуществляют по наружному термометру.
20. Партию биотестов считают годной для использования, если показатели устойчивости спор тест-культуры B. licheniformis штамм G соответствуют требованиям, указанным в таблице.
Устойчивость спор тест-культуры B. licheniformis штамм G на носителе к действию сухого горячего воздуха температурой 160 ± 2 °С в воздушном стерилизаторе
[ Ответ на тему ]
15.12.2009 // 22:47:48 Редактировано 2 раз(а)
°C, время стерилизационной выдержки 60 минут в упаковке из бумаги (чашечки из фольги раскладывают в чашки Петри).