в какую пробирку берут тропониновый тест
Использование тропонинового теста для диагностики инфаркта миокарда
При инфаркте в результате острого тромбоза коронарных сосудов развиваются ишемия и некроз участка миокарда. Также к сердечному приступу приводит сердечная недостаточность с прогрессирующим сужением артерий, нарушением кровообращения. От своевременности выявления коронарной патологии зависит жизнь пациента. Ранняя диагностика включает проведение кардиограммы, УЗИ и определение специфических белков — тропонинов. Тропониновый тест при инфаркте миокарда позволяет в первые часы выявить изменения, подтвердить диагноз и доставить больного в больницу.
Когда надо делать тропониновый тест
Инфаркт миокарда — это острое, угрожающее жизни состояние, вызванное нарушением кровообращения на участке миокарда в результате полной или частичной закупорки коронарной артерии тромбом. Это приводит к ишемии и некрозу части сердечной мышцы. В последующем шансы благополучного исхода зависят от своевременности оказания медицинской помощи.
Тест на инфаркт миокарда проводится при первых симптомах сердечного приступа:
Также использование экспресс теста на инфаркт рекомендовано пациентам со стенокардией, ишемической болезнью с частыми приступами загрудинной боли.
Тропониновый анализ применяют:
Техника выполнения
В настоящее время в аптеках представлены различные экспресс-тесты для выявления инфаркта. Диагностический набор для качественного определения тропонина I или же комбинированные, которые дополнительно определяют миоглобин и креатинфосфокиназу, — маркеры некроза (гибели) миокарда сердца.
В наборе такого теста имеется:
Техника проведения анализа достаточно проста, необходимо:
Оценивать тест необходимо по инструкции. В стандартных тропониновых тестах следует учитывать:
Какова диагностическая ценность теста
Тропонин — это особый белок, который содержится в клетках кардиомиоцитов сердца и почти не определяется в крови в нормальном состоянии. Основная причина повышения его концентрации — некроз миокарда. В современной медицине определение тропонина в диагностике инфаркта миокарда занимает ведущую позицию.
Маркеры повышаются в крови через 3—6 часов после сердечного приступа и содержатся в кровотоке до двух недель. Для тропонина I характерна пиковая концентрация через 12—24 часа с нормализацией значений в течение 1—2 недель, когда тест становится отрицательным. Поэтому экспресс-анализы подходят не только для домашнего использования, но и для выявления динамики в условиях стационарного лечения. Также данный тест показан для определения случаев повторного инфаркта.
Ценность самого экспресс-метода заключается в следующем.
За счет этого экспресс-тест достоверен и эффективен. Исключение составляют случаи слабой окраски сигнальных полосок или отрицательного результата на фоне болевого синдрома, что требует обязательной госпитализации больного для дальнейшего наблюдения.
Пусковым механизмом инфаркта является острое нарушение кровообращения в коронарных сосудах, что приводит к гибели участка миокарда в течение нескольких минут и представляет угрозу для жизни. От своевременности оказания медицинской помощи зависит дальнейший прогноз.
Тест-набор для определения маркеров инфаркта — тропонинов — позволяет в кратчайшие сроки выявить коронарную патологию. При получении положительного результата дома необходимо вызвать скорую помощь. При выявлении тропонинов в условиях больницы или поликлиники пациент доставляется в специализированный кардиологический стационар для дальнейшего обследования и лечения.
Для подготовки материала использовались следующие источники информации.
«ГОРОДСКАЯ ПОЛИКЛИНИКА №8»
ХАРЬКОВСКОГО ГОРОДСКОГО СОВЕТА
Запись к врачу
11111111
ТРОПОНИНОВЫЙ ТЕСТ — СПЕЦИФИЧЕСКИЙ МАРКЕР ПОВРЕЖДЕНИЙ МИОКАРДА
О биохимическом анализе состава крови — тропониновом тесте, который выполняется специалистами клинико-диагностической лаборатории КНП «Городская поликлиника №8» ХГС, — рассказывает заведующий КДЛ Татьяна Ишуткина.
Сердечно-сосудистые заболевания (острый миокард и острый коронарный синдром) являются наиболее распространенными причинами смертности. При жалобах пациента на боль в грудной клетке, когда отсутствуют существенные изменения на ЭКГ, врачи обычно назначают серию тестов на тропонины. Это необходимо для того, чтобы в максимально короткие сроки начать проведение необходимых своевременных диагностических и лечебных мероприятий.
Анализ крови на содержание кардиоспецифических тропонинов используется как специфический маркер при повреждении миокарда, особенно при остром коронарном синдроме и при отсутствии специфических изменений на ЭКГ.
Тропониновый тест — это биохимический анализ состава крови, позволяющий выявить присутствие в нем белка тропонина (Тн). Этот белок просачивается в систему кровотока из погибших кардиомиоцинтов при инфаркте (клеток мышцы сердца).
Тропониновый тест при сердечном приступе инфаркта применяют уже десять лет. Восприимчивость биохимического анализа на белок тропонин около 100,0%.
При инфаркте главное не терять время для экстренной терапии, поэтому идеальным решением является применение экспресс-метода тропонинового теста. Экспресс тропониновый тест относится к качественному метода диагностирования пропонина.
Тропониновый тест проводится в следующих случаях:
Тропониновый тест хорошо помогает при застарелых микроинфаркты, когда другие маркеры дают псевдо положительную информацию.
Тропониновый тест позволяет провести анализ тем пациентам, которые перенесли бессимптомно микроинфаркт на ногах или нападение было без ярко выраженной симптоматики.
Такое состояние принимается за приступ стенокардии и купируется нитроглицерином. Показатель присутствия в плазме тропонинов позволяет провести медикаментозное лечение и не допустить осложненной формы микроинфаркта.
К широкому спектру анализов, выполняемых в клинико-диагностической лаборатории КНП «Городская поликлиника №8» ХГС, входит и проведение теста на тропонины. В случае необходимости по назначению врача специалисты КДЛ быстро и качественно проводят это исследование.
Экспресс-тест для определения сердечного тропонина в диагностике инфаркта миокарда
Рисунок 1
Сердечный тропонин является диагностическим маркером для выявления сердечного приступа. Подобные экспресс-тесты помогают установить быстрый диагноз. Структурные иллюстрации сердечного тропонинового комплекса на рисунке получены из кристаллической структуры 1J1D, депонированной в RCSB PDB. [4, 5]
Инфаркт миокарда (сердечный приступ или ИМ) представляет собой острое состояние, требующее неотложной медицинской помощи.[1] Большинство сердечных приступов случаются внезапно, когда одна из артерий, ведущих к сердцу, блокируется обычно тромбом и перекрывает кровоток. Недостаток крови блокирует поступление кислорода и питательных веществ. Без них клетки сердца начинают отмирать. Когда речь идет о лечении сердечного приступа, каждая секунда на счету. Обширная закупорка, особенно крупного кровеносного сосуда, может вызвать сильный сердечный приступ. Если не лечить сердечный на ранней стадии, это может привести к сердечной недостаточности. Причиной инфаркта миокарда является накопление бляшек из жира и других веществ, из-за которых сужаются или затвердевают артерии.
Своевременная диагностика имеет первостепенное значение для раннего лечения ИМ
Сердечные тропонины в качестве диагностических маркеров
Иммуноанализы, специфичные для сердечных изоформ тропонина, могут показать повышение их уровней в периферической крови независимо от уровней скелетных тропонинов. Разработан ряд иммуноанализов, специфичных для cTnI или cTnT, которые соответствуют одним и тем же характеристикам, и не имеют различий с точки зрения их диагностической и прогностической значимости. cTn (I или T) является предпочтительным биомаркером некроза миокарда из-за его высококачественных характеристик в диагностике и прогнозе сердечных состояний.[6]
Диагностическое исследование на повышенный уровень сердечного тропонина
За последнее десятилетие анализ крови на содержание cTnI стал более чувствителен. Диагностические пороговые значения лабораторных анализов находятся в диапазоне 0,01-0,05 нг / мл [10]. Большинство экспресс-тестов с визуальным считыванием имеют диагностические пороги между 0,5 и 1 нг / мл (Hexagon Тропонин: 0,5 нг / мл), что превышает пороговые значения лабораторных анализов. В чем же тогда преимущества экспресс-теста по сравнению с лабораторным анализом cTnI?
Экспресс-тесты помогают выявить ИМ раньше, чем лабораторные анализы
Данный экспресс-тест имеет множество преимуществ для его использования в диагностике ИМ: простота использования, надежность, считывание показаний без использования приборов и использование капиллярной крови, взятой из пальца. Однако, ключевым преимуществом является способность RDT в определенных условиях выявлять повышенный cTnI раньше, чем лабораторный анализ. В случае инфаркта миокарда раннее лечение имеет решающее значение, что может помочь избежать обширного поражения сердца. Своевременная диагностика имеет первостепенное значение для раннего лечения ИМ. RDT может использоваться всякий раз, когда необходимо получить результат раньше лабораторного анализа.
В каких случаях используется экспресс-тест на тропонин?
Догоспитальная диагностика
Рисунок 2
Концентрация сердечного тропонина (cTnI) в периферической крови повышается после сердечного приступа в 100 раз.
Пороговое значение данного теста для диагностики повышенного cTnI составляет около 0,5 нг / мл. Рисунок из Mahajan and Jarolin, Circulation, 2011.[11].
Доставка пробы крови пациента в центральную лабораторию может занять несколько часов. Кроме того, тест cTnI в лабораторных условиях связан с длительным сроком выполнения. Напротив, тест cTnI с помощью RDT можно провести на месте, и результат будет известен почти мгновенно. В случае положительного результата можно немедленно начать лечение пациента.
Переполненное отделение неотложной помощи
Переполненность отделений неотложной помощи (ED) больницы является широко признанной проблемой, которая, как было показано, приводит к увеличению стационарной смертности.[12] Рекомендации ведущих кардиологических ассоциаций указывают, что результаты cTn должны быть доступны врачам в течение 60 минут после прибытия в отделение неотложной помощи. [13, 8] Вопреки этим рекомендациям, даже в развитых странах время от взятия крови в отделении неотложной помощи до получения результата анализа на содержание тропонина составляет от одного до двух часов [14]. Переполненность отделений часто приводит к сбою в обработке образцов и увеличивает время выполнения лабораторных работ.[15] Тест на cTn с помощью RDT cTnI, легко может сделать медсестра независимо от центральной лаборатории. Своевременно выявляя повышение cTnI, RDT позволяет в короткие сроки предоставить важную информацию для медицинской сортировки пациентов. Это может сократить задержу лечения пациента, а также снизить общую нагрузку на отделение.
Краткая информация
Экспресс-тесты на определение cTnI просты в использовании и считывании результата, надежны, совместимы с капиллярной кровью и, прежде всего, дают быстрый результат. Благодаря этим функциям они идеально подходят для диагностики инфаркта миокарда в догоспитальных условиях. Данные тесты помогают при сортировке в отделениях неотложной помощи. Однако, диагноз острого инфаркта миокарда не должен основываться только на результатах экспресс-теста, он также должен включать симптомы пациента, ЭКГ и/или ангиографические данные. Тесты позволяют подтвердить острый ИМ, но не исключить его. Отрицательный результат данного теста с последовательными заборами крови во временном промежутке от нескольких часов до нескольких дней после появления симптомов может указывать на легкую форму инфаркта миокарда или другого сердечного заболевания.
Тропонин I (высокочувствительный) (венозная кровь) в Талас
Приём и исследование биоматериала
Подробное описание исследования
Тропонин I – это белок, находящийся в сердечной и скелетной мышцах, и в норме содержание его в сыворотке крови крайне мало. Тропонин I миокарда отличается по своей структуре от тропонина I скелетной мускулатуры, и массивный выход «сердечного» тропонина в кровь однозначно указывает на острое повреждение миокарда. Это один из самых высокоспецифичных кардиомаркеров, уровень которого возрастает уже через 4-6 часов после появления болей в сердце, и удерживается до 6-7 дней, достигая максимума ко вторым суткам. Такая устойчивость тропонина I в крови позволяет использовать данный показатель для диагностики инфаркта миокарда не только в первые часы, но и в более поздние сроки (в практике нередко встречаются случаи малосимптомного течения инфаркта, и основными диагностическими ориентирами в этих ситуациях служат ЭКГ и кардиомаркер тропонин).
Подготовка к исследованию
Специальной подготовки к исследованию не требуется. Необходимо следовать общим правилам подготовки к исследованиям.
ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К ИССЛЕДОВАНИЯМ:
1. Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи. Для тестов на инфекции и экстренных исследований допустимо сдавать кровь через 4-6 часов после последнего приема пищи.
2. ВНИМАНИЕ! Специальные правила подготовки для ряда тестов: строго натощак, после 12-14 часового голодания, следует сдавать кровь на гастрин-17, липидный профиль (холестерин общий, холестерин-ЛПВП, холестерин-ЛПНП, холестерин-ЛПОНП, триглицериды, липопротеин (а), аполипо-протен А1, аполипопротеин В); глюкозотолерантный тест выполняется утром натощак после 12-16 часов голодания.
3. Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом).
4. За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.
5. Не следует сдавать кровь для лабораторного исследования сразу после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования, рентгенологического и ультразвукового исследований, массажа и других медицинских процедур.
6. При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях – в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и пр.
7. Кровь для исследований нужно сдавать до начала приема лекарственных препаратов или не ранее, чем через 10–14 дней после их отмены. Для оценки контроля эффективности лечения любыми препаратами нужно проводить исследование спустя 7–14 дней после последнего приема препарата.
Если Вы принимаете лекарства, обязательно предупредите об этом лечащего врача.
О чем следует помнить при определении концентрации тропонина в крови? Д.С.Бен.
О чем следует помнить при определении концентрации тропонина в крови? Д.С.Беневоленский специалист по продукции компании Radiometer Medical ApS (Дания)
Клиническая необходимость определения концентрации тропонина в крови. Определение концентрации сердечных тропонинов I или T в крови больного – краеугольный камень современной лабораторной диагностики инфаркта миокарда. Согласно рекомендациям как Европейского общества кардиологов [1], так и Национальной академии клинической биохимии (США) [2] определение концентрации сердечных тропонинов следует проводить у всех больных с подозрением на острый коронарный синдром. Сходные рекомендации приняты и Всероссийским научным обществом кардиологов. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 19 августа 2009 г. № 599н «Об утверждении порядка оказания плановой и неотложной медицинской помощи населению Российской Федерации при болезнях системы кровообращения кардиологического профиля» предписывает всем лечебно-профилактическим учреждениям, где оказывается неотложная помощь больным с сердечно-сосудистыми заболеваниями, проводить определение уровня тропонинов «в экстренном (безотлагательном) порядке и в любое время суток». Такое внимание к тропонинам, а точнее к сердечным изоформам тропонинов I и T, определяется их уникальной биохимической структурой, что позволяет создать тест-системы с высочайшей клинической чувствительностью и специфичностью в отношении повреждения миокарда. В 2007 году решением наиболее авторитетных американских, европейских и международных кардиологических ассоциаций диагноз инфаркта миокарда был впрямую связан с повышением уровня тропонина в крови [3].
Согласно рекомендации Международной федерации клинической химии и лабораторной медицине (IFCC) аналитическая чувствительность метода должна быть примерно в 5 раз ниже клинически значимого порогового уровня [4]. Кроме того, общая погрешность, определяемая коэффициентом вариации (CV), на ВРП не должна превышать 10%, иначе тест будет давать много ложно-положительных и ложно-отрицательных результатов. Устройства для внелабораторной диагностики (POCT-анализаторы) должны соответствовать тем же критериям [4].
Использование 99-ой процентили распределения концентраций тропонина у здоровых людей в качестве ВРП дает превосходную клиническую чувствительность и специфичность по отношению к острому инфаркту миокарда. В таблице 1 приведены эти величины для нового анализатора для внелабораторной диагностики неотложных состояний AQT90 FLEX компании Radiometer. В качестве пороговой величины, отличающей норму от патологии взята концентрация 0,023 мкг/л, соответствующая 99-ой процентили.
Таблица 1. Клиническая чувствительность и специфичность по отношению к острому инфаркту миокарда на уровне ВРП (99-я процентиль) | |||
При поступлении (0–2 часа) | Через 6–9 часов после поступления | ||
Чувствительность | Специфичность | Чувствительность | Специфичность |
65% | 91% | 91% | 88% |
Достаточно точное количественное определение уровня тропонина позволяет не только подтвердить некроз миокарда, но и установить степень риска серьезных осложнений и смерти с целью выбора наиболее адекватного метода лечения. На рисунке 1 представлен упрощенный алгоритм диагностики острого коронарного синдрома, принятый Европейским обществом кардиологов.
Поступление | ® | Боль в груди | ||
Рабочий диагноз | ® | Подозрение на острый коронарный синдром | ||
ЭКГ | ® | Стойкое повышение сегмента ST | Нарушения ST/T | Норма или неопределенные изменения ЭКГ |
↓ ↘ | ↙ ↓ | |||
Биохимия | ® | Тропонин ↑ | Тропонин отрицательный дважды | |
Стратификация риска | ® | Высокий риск | Низкий риск | |
Диагноз | ® | ИМ (+) ST | ИМ (–) ST | Нестабильная стенокардия |
Лечение | ® | Реперфузия | Инвазивное | Неинвазивное |
Рисунок 1. Алгоритм обследования при остром коронарном синдроме [1]. Все современные клинические и лабораторные рекомендации не делают различий между тропонинами I и T с точки зрения диагностики инфаркта миокарда.
Трудности определения концентрации тропонинов в крови.
В крови здоровых людей концентрация этих белков крайне мала. Концентрация тропонина I на уровне ВРП примерно 3 000 000 000 меньше общей концентрации белков в плазме, в 5000 и в 300 раз меньше соответствующих концентраций других широко известных биомаркеров некроза – миоглобина и креатинкиназыMB. Тройной комплекс тропониновI,T иC, попадая из некротизированных кардиомиоцитов в кровь, распадается на свободный тропонинT и двойной комплекс из тропониновI иC. Это и есть основные формы тропонинов в крови. Однако уже внутри кардиомиоцитов начинается протеолитическое расщепление тропониновI иT[5].В крови протеолиз продолжается, что приводит к постепенному отщеплению концевых фрагментов молекул тропонинаI(рис. 2). Кроме того, тропонинI подвергается фосфорилированию /дефосфорилированию и окислению. Поэтому в крови циркулирует не собственно тропонин, а постоянно изменяющийся спектр его модифицированных фрагментов.Все имеющиеся на сегодняшний день методы определения концентрации тропонина основаны на иммунохимической реакции, так называемом сэндвич-анализе. Обычно используется 1–2 типа антител для связывания антигена и 1–2 типа детекторных антител, меченных каким-либо способом. Применяются мышиные моноклональные антитела, полученные против определенного эпитопа сердечного тропонина. Они способны связаться лишь с некоторыми фрагментами молекулы тропонина. Различия в наборах антител у разных производителей тестов – основная причина в разбросе абсолютных величин, получаемых разными тест-системами при определении тропонина в крови больных. Специальный комитет Международной федерации клинической химии и лабораторной медицине (IFCC) совместно с Американской ассоциацией клинической химии (AACC) приложили немало усилия для стандартизации тестов на тропонинI. Национальным институтом стандартов и технологий США (NIST) был принят новый стандартный референтный материал для сердечного тропонинового комплекса человека SRM 2921, который должен помочь в будущей стандартизации тестов на тропонин. При практически идеальной корреляции величин, полученных наилучшими тест-системами, абсолютная величина концентрации может различаться в 5–10 раз. Поэтому прямое сравнение абсолютных значений невозможно, а границы нормы должны быть определены отдельно для каждого метода. И хотя клиническая интерпретация результатов с учетом соответствующих референтных диапазонов в целом совпадает для всех тестов, эта ситуация создает очевидное неудобство. Остаются и «серые зоны», особенно в близкой к ВРП области значений. Частично это связано со статистической природой, получаемых данных, а частично с трудностью и неточностью определения ВРП, то есть 99-й процентили распределения концентрации в группе здоровых людей. Тест-системы для определения тропонинаT до недавнего времени выпускал только один производитель –RocheDiagnostics, поэтому результаты определения его концентрации разными анализаторами были сопоставимы.
Анализатор Radiometer AQT90 FLEX впервые может определить как тропонин I, так и тропонин T в одной пробе. |
Следует помнить о статистическом характере полученных в результате анализа величин, причем, чем ниже концентрация, тем больше погрешность определения. Например, если истинная концентрация тропонина в пробе составляет 0,039 мкг/л, а CV в этой точке равен 10%, то при идеальной работе анализатора по законам статистики из 1000 определений 956 попадут в интервал 0,031–0,047 мкг/л, но в одном случае полученная величина будет ниже 0,027 мкг/л, а еще в одном – выше 0,051 мкг/л.
Возможные ошибки при определении концентрации тропонинов в крови. Если лабораторные данные существенно расходятся с клинической картиной, то возможно, что это произошло в результате ошибки анализа.
Преаналитические ошибки. Преаналитический этап – источник примерно 60–70 % ошибок в экспресс-лаборатории[6]. Их причинами могут быть неправильная идентификация больного или пробы, ошибки забора пробы крови, использование неправильных пробирок или антикоагулянтов, неправильная обработка и хранение пробы. Значительного числа ошибок можно избежать при использовании стандартных средств забора крови, например вакуумных пробирок. При работе с сывороткой причиной ложно-положительных результатов определения тропонина могут быть наличиефибриновых сгустков в результате неполного свертывания крови, например убольных с коагулопатиями или получающих антикоагулянтную терапию. Причиной ошибок могут быть и другие микрочастицы в образце. Некоторые тест-системы очень чувствительны к гемолизу.
Анализатор Radiometer AQT90 FLEX работает со стандартными вакуумными пробирками большинства производителей, содержащими гепарин или ЭДТА, и не требует никакой обработки или раскапывания пробы крови, что экономит время и исключает значительную часть преаналитических ошибок. Встроенный сканер распознает штрих-код на пробирке. Применение системы 1stautomatic позволяет связать данные о больном, пробе и операторе и передать их в информационную систему во время взятия пробы, что исключает ошибки идентификации. |
Аналитические ошибки. Неправильная работа анализатора – возможная причина аналитических ошибок. Прежде всего, необходимо убедиться, что анализатор откалиброван в соответствии с требованиями производителя, и что проведен надлежащий контроль качества. Скрытой причиной получения ложно-отрицательных или ложно-положительных результатов определения тропонинов может быть наличие интерферирующих веществ в пробе крови, например:гетерофильных антител, человеческих антител против антигенов животных, ревматоидного фактора и аутоантител к тропонину;эндогенных компонентов крови, таких как билирубин и гемоглобин;иммунных комплексов;высокой концентрации щелочной фосфатазыГетерофильные антитела – это антитела, образующиеся против неизвестных антигенов (часто инородных белков). Человеческие антитела против антигенов животных – это циркулирующие антитела человека против белков животных. Сообщалось о циркулирующих антителах, специфичных к широкому спектру иммуноглобулинов животных, таких как мышь, крыса, кролик и другие. У больного эти антитела могут появиться вследствие разных причин, включая применение мышиных моноклональных антител для лучевой диагностики и лечения рака; контакт с микробными антигенами; контакт ветеринаров, фермеров и рабочих пищевой промышленности с инородными белками; присутствие в доме домашних животных. Аутоиммунные заболевания приводят к образованию таких аутоантител, как ревматоидный фактор (антитела кFc-фрагменту иммуноглобулиновG). Распространенность интерферирующих антител среди населения достаточно велика. Все эти находящиеся в крови антитела могут перекрестно взаимодействовать со связывающими и детекторными антителами тест-системы, приводя к положительному результату в отсутствие в пробе тропонина.Помимо этого, у 5,5% людей без признаков сердечно-сосудистых заболеваний и у 21% больных с острым коронарным синдромом были обнаруженыаутоантитела к тропонинуI [7]. Взаимодействуя с центральной частью молекулы тропонина, они могут блокировать связывание антител тест-системы, что иногда приводит к ложно-отрицательным результатам анализа.Из-за большого разнообразия интерферирующих антител какого-либо специфического теста, который мог бы подтвердить или исключить присутствие интерферирующих антител в пробе не существует. Лабораторные специалисты должны заподозрить наличие интерферирующих антител в тесте на тропонин, когда результат теста:расходится с клиническими данными о больном;не воспроизводится на той же или на другой тест-системе;результат нелинеен после серии разведений.
Тест-система анализатора Radiometer AQT90 FLEX для предотвращения эффекта интерферирующих антител содержит мышиный IgG и бычий γ-глобулин. Одно из связывающих и детекторное антитела тест-системы взаимодействуют с тропонином за пределами его центрального участка – мишени аутоантител к тропонину, что снижает влияние аутоантител на результаты анализа. В качестве способа получения сигнала от детекторных антител выбран чисто физический метод: флюоресценция хелата европия с временным разрешением. Это исключает влияние избытка щелочной фосфатазы, отмеченного при ферментативном методе. Наконец, гемолиз не оказывает влияния на результаты анализа как тропонина I, так и тропонина T [8]. |
Постаналитические ошибки. Обработка информации, сравнение с референтными диапазонами и передача данных лечащему врачу существенно упрощаются, а риск ошибок уменьшается при подключении анализатора к информационной системе.Важно помнить, что тропонины выходят в кровь не сразу после возникновения некроза. Поэтому результат определения тропонина может быть отрицательным на фоне очевидных признаков острого инфаркта миокарда, если забор проб крови производился в первые часы после начала болевого приступа. В то же время, анализ пробы крови сразу после поступления больного в приемное отделение дает важную клиническую информацию (Таблица 1).Важнейшая часть постаналитического этапа – помощь клиницистам в интерпретации полученных данных. Здесь необходим вдумчивый подход и выработка общих правил оценки результатов, полученных разными тест-системами, например, на портативных анализаторах у постели больного и в центральной лаборатории.Хотя повышение уровня тропонина в отсутствие острого инфаркта миокарда происходит довольно редко, оно может ввести врача в заблуждение. В случае сомнения в достоверности результата нужно постараться найти другую возможную клиническую причину повышения уровня тропонина, не связанную с инфарктом миокарда, повторно проанализировать клиническую картину и назначить дополнительные диагностические тесты. Возможные причины повышения концентрации тропонинов приведены в таблице 2.
Таблица 2. Причины повышения уровня тропонина в отсутствие ишемической болезни сердца [3]. |
Ушиб сердца или другая травма вследствие хирургической операции, катетерной деструкции, электрокардиостимуляции и т.д.Застойная сердечная недостаточность – хроническая или остраяРасслаивание аортыПорок аортального клапанаГипертрофическая кардиомиопатияТахи- или брадиаритмии или атриовентрикулярная блокадаСиндром «разбитого сердца» (кардиомиопатия такоцубо) Рабдомиолиз с поражением сердцаТромбоэмболия легочной артерии, тяжелая легочная гипертензияПочечная недостаточностьОстрые неврологические заболевания, включая инсульт и субарахноидальное кровоизлияниеИнфильтративные заболевания, такие как амилоидоз, гемохроматоз, саркоидоз и склеродермияВоспалительные заболевания, такие как миокардит или поражение миокарда при эндо- или перикардитеУпотребление наркотиков или токсических веществКритические состояния, особенно в сочетании с дыхательной недостаточностью или сепсисомОжоги, особенно, если они поражают >30% поверхности телаЧрезмерные физические нагрузки |
Что делать в случае сомнения в правильности определения тропонинов в крови?
1) Прежде всего, нужно убедиться в правильности работы анализатора. Для этого необходимо проводить калибровки и техническое обслуживание с частотой, рекомендованной производителем. В случае сомнения, проведите измерение образцов контроля качества в соответствии с рекомендациями производителя. По меньшей мере, один контрольный образец должен соответствовать клинически значимой пороговой концентрации (ВРП) тропонина.
2) Проверить правильность взятия пробы крови, и повторить взятие пробы и тестирование. Если анализатор проходит все контроли качества, забор пробы крови осуществляется в соответствии с инструкциями производителя, а результат анализа по-прежнему не соответствует клинической картине, то нужно попытаться найти скрытую причину в особенностях пробы или заболевания:
1) Повторить анализ пробы после нескольких разведений и проверить линейность результатов, нарушение которой позволяет выявить интерферирующие антитела.
2) Использовать имеющиеся в продаже гетерофильные блокирующие агенты (обычно это смесь иммуноглобулинов) или нормальную мышиную (или другого животного) сыворотку в качестве блокирующего агента. 3) Проверить возможность негативного влияния билирубина и/или гемоглобина.
4) По возможности, повторить анализ той же пробы с помощью другой тест-системы для проверки результата. Если нет другой тест-системы, то послать образец в другую лабораторию для проверки другим способом.
5) Если имеется достаточное количество образца, сохранить часть пробы для дальнейшего тестирования в другой лаборатории или производителем.
6) Обсудить с лечащим врачом противоречия между результатом анализа и клинической картиной. Повторно проанализировать клиническую картину и назначить дополнительные диагностические тесты (например, рассмотреть возможность другой причины боли в груди, повторить ЭКГ и т.д.), и постараться найти другую возможную клиническую причину повышения уровня тропонина, не связанную с инфарктом миокарда.
ЛИТЕРАТУРА [1] Guidelines for the diagnosis and treatment of non-ST-segment elevation acute coronary syndromes. European Heart Journal (2007) 28, 1598–1660. [2] National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice Guidelines: Clinical Characteristics and Utilization of Biochemical Markers in Acute Coronary Syndromes. Circulation (2007) 115, e356-e375. [3] Thygesen K, Alpert JS, White HD on behalf of Joint ESC/ACCF/AHA/WHF Task Force for the Redefinition of Myocardial Infarction. Universal definition of myocardial infarction. Circulation (2007) 116(22), 2634-53. [4] Apple FS, Jesse RL, Newby LK, Wu AH, Christenson RH. National Academy of Clinical Biochemistry and IFCC Committee for Standardization of Markers of Cardiac Damage Laboratory Medicine Practice Guidelines: Analytical issues for biochemical markers of acute coronary syndromes. Circulation (2007) 115(13), e352-5. [5] Labugger R, Organ L, Collier Ch, Atar D, Van Eyk JE. Extensive Troponin I and T Modification Detected in Serum From Patients With Acute Myocardial Infarction. Circulation (2000) 102, 1221-1226. [6] Carraro P, Plebani M. Errors in a stat laboratory: types and frequencies 10 years later. Clinical Chemistry (2007) 53(7), 1338-42. [7] Pettersson K, Eriksson S, Wittfooth S, Engström E, Nieminen M, Sinisalo J. Autoantibodies to Cardiac Troponin Associate with Higher Initial Concentrations and Longer Release of Troponin I in Acute Coronary Syndrome Patients. Clinical Chemistry (2009) 55, 938-945. [8] Bais R. Characterisation of the Radiometer AQT90 Flex Troponin I and T Assays. Abstract AACB Conference 2010.
Рисунок 2. Факторы, влияющие на выбор антител для определения тропонина I.